文件名称AB7500 荧光定量 PCR 仪使用、维护、校准标准操作规程颁发部门制订人: 复核人: 批准人: 质保部制订日期:复核日期:批准日期:执行日期版本1.0编号SOP04006制作份数_____份发送部门修订记录修订人修订原因修订内容版本 修订日期1. 目的:确保荧光定量 PCR 仪能够正确和正常的使用,保证扩增及结果分析的标准化、法律规范化。2. 范围:适用于 AB7500 荧光定量 PCR 仪的使用及维护。3. 定义:无4. 职责:荧光定量 PCR 仪使用人员负责本规程的实施。质保部对本规定的有效执行承担监督检查责任。5. 内容:5。1 室内温度控制在 15~30℃,相对湿度 45~75%。5。2 仪器操作5.2.1 依次打开电脑显示器和电脑主机的电源开关,进入 Windows 界面.5.2.2 接着打开 AB7500 仪器电源开关,预热 10 分钟.5。2。3 点击 7500 Software v2。3 图标,打开软件.5。2.4 按压仪器托盘上的按压位,待托盘弹出后,将所需检测的 8 联 PCR 反应管或者 96 孔 PCR 反应板放入检测孔位,记下放置位置.检测 8 联 PCR 反应管用**反应孔模块,检测 96 孔 PCR 反应板用**反应孔模块.(检测 8 联 PCR 反应管需放入盖紧管盖的空 8 联 PCR 反应管配平,检测 96 孔PCR 反应板无需配平)5。2。5 再次按压托盘使其滑入仪器。5。2。6 新建扩增参数模板:例如新建一个 UG—63—62 的模板,扩增参数是 95°,10′;(95°,10″;63°,45″)×5 cycles;(95°,10″;62°,35″)×40 cycles,在 62°时收集荧光信号(HEX、FAM 信号),20μl 反应体系。5。2.6.1 在 Setup-Plate Setup-Define Targets and Samples 中,将 Target Name 下的 Target1 改成FAM;点击 Add New Target,将新增的 Target1 改成 HEX,点击 Reportee 下拉菜单,选择VIC.5。2。6。2 在 Setup-Run Method—Graphical View 中的 Reaction Volume Per Well 后面输入 20(20μl反应体系)。选中第一个 Holding Stage,点击 Delete Selected 删除;在 Cycling Stage 中的Number of Cycles 后输入 5,在 Step1 中输入时间 10 秒,在 Step2 中输入温度 63 度,输入时间 45 秒,将 63 度下面收集荧光图标点掉;点击 Add Stage 下拉菜单选择 Cycling,在 Cycling Stage 中的 Number of Cycles 后输入 40,在 Step1 中输入时间 10 秒,在 Step2 中输入温度 62度...