对象:全院职工医疗药事制度文件名称:Rh(D)血型鉴定编写日期:2025。1修订日期:2025.4执行日期:2025.4注:① 本文件仅供本院人员使用,未经同意,不得翻印②本文件最终解释权归输血科Rh(D)血型鉴定【原理】Rh 血型系统是输血医学中仅次于 ABO 系统的第二大血型系统.Rh 血型系统常见的抗原有 D 和C、c、E、e 五种,分别由 RHD 基因和 RHCE 基因编码,RhD 和 RhCE 蛋白均是反复穿膜的蛋白质.使用相应的抗 D、抗 C、抗 c、抗 E、抗 e 五种血型试剂可以鉴定这些抗原.临床上,D 抗原是 Rh 抗原中免疫原性最强的抗原,也是最具有临床意义的抗原,一般只做 D 抗原鉴定,凡带有 D 抗原者称为 Rh 阳性,不带 D 抗原者称为 Rh 阴性。1.试管法 【样本】抗凝或不抗凝的样本均可用于 Rh 鉴定试验.红细胞可悬浮在自身血清、血浆或盐水中,也可以洗涤后悬浮于盐水中。【试剂】(1)IgM 抗 D 试剂(2)Rh 对比试剂【操作】(1)加 1 滴抗 D 到一干净试管,并做好标记(2)加 1 滴 Rh 对比试剂到第二个干净试管中,并做好标记(3)分别加 1 滴 2%~5%红细胞悬液到每支试管中(4)轻轻混匀,通常(900~100)×g 离心 15 秒(5)轻轻重悬细胞扣,检查凝集(6)评价反应强度,记录试验管和对比管得试验结果【结果判定】(1)抗 D 管凝集,对比管不凝集表明红细胞是 RhD 阳性(2)对比管和抗 D 管均阴性,说明待测红细胞是 RhD 阴性结果(3)对比管凝集则试验无效 2。玻片法【样本】用玻片法进行 RhD 定型时,待检红细胞悬液的浓度是 40%~50%【试剂】适合用于玻片法的低蛋白抗 D 试剂【操作】(1)加 1 滴抗 D 到一干净的玻璃片或白瓷板凹孔中,并做好标记(2)加 1 滴适合的对比试剂到另一干净的玻璃片或白瓷板凹孔中,并做好标记(3)向以上玻片或白瓷板凹孔中的每一种试剂中分别加 1 滴混匀的 40%~50%待检红细胞悬液(4)充分混合抗体试剂和细胞,用搅拌棒将混合物均匀分散(5)不断地从一边到另一边轻轻倾斜转动玻片或白瓷板,持续大概 2 分钟(6)读取,解释并记录所有玻片或白瓷板凹孔中的结果【结果判定】(1)抗 D 试剂与红细胞反应表现凝集,而对比为阴性反应,表明待检红细胞为 RhD 阳性(2)抗 D 试剂与对比均为阴性反应,表明待检红细胞为 RhD 阴性(3)对比管凝集则试验无效【注意事项】玻片法可能存在感染性标本暴露的风险,需要注意防范;玻片法不适用于检测弱...