临床生化检验基础知识培训一、生化基础知识1
1 生化诊断试剂盒为由一定的化学品或者酶类组成的多成分混合试剂(Reagent),最终以水溶液的方式与待测物发生一系列化学或者生化反应,通过生成物或反应物中某物质的吸光度变化,测量待检测物中某种特定物质的含量
2 生化诊断试剂用于检测样本,包括:人体血清(主要)、血浆及尿液中的各种酶类和代谢产物,用于预测,诊断以及治疗监测,协助临床医生诊治疾病提供数据参考
3 按功能分为:肝功、血脂、肾功、心肌、代谢、免疫&风湿、离子&其他
4 试剂性能评价指标:1 试剂外观2 批间差3 准确度4 精密度5 线性(灵敏度)6 抗干扰能力(特异性)7 稳定性1
5 试剂检测原理(朗伯比尔定律):A=Kbc 式中,A 为吸光度;K 为吸收系数,是与入射辐射的波长及吸收物质的性质有关的常数 ;b 为液层厚度,单位为 cm;c 为吸收物质的浓度
当浓度的单位为 mol/L 时,K 的单位为 L/mol·cm,称为摩尔吸收系数,通常用 ε 表示
摩尔吸收系数 ε 表示物质对某一波长的辐射的吸收特性
ε 愈大,表示物质对某波长辐射的吸收力愈强,因而分光光度法测定的灵敏度就愈高
6 理论值与实测值偏差的解释:实测值偏离了朗伯比尔定律
偏离 Lambert-Beer 定律的因素:1 复合光对 Beer 定律的偏离:吸收定律要求入射光为单色光,而分光光度计单色光的纯度主要决定于色散元件及光路设计,即使高精度的仪器,也得不到纯单色光,而是波长宽度的复合光,其结果导致偏离 Lambert Beer 定律
2 杂散光的影响:杂散光(stray light) 是进入检测器待测波长以外的光
主要来源于仪器色散元件表面的散射、单色器内壁尘埃等
3 狭缝宽度的影响:单色器设有进、出口狭缝,狭缝愈窄,单色光愈纯,吸光度增加,但辐射能减小,对弱吸收带的测量有一定影响