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临床生化检验应用工程师基础知识培训

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临床生化检验基础知识培训一、生化基础知识1.1 生化诊断试剂盒为由一定的化学品或者酶类组成的多成分混合试剂(Reagent),最终以水溶液的方式与待测物发生一系列化学或者生化反应,通过生成物或反应物中某物质的吸光度变化,测量待检测物中某种特定物质的含量。1。2 生化诊断试剂用于检测样本,包括:人体血清(主要)、血浆及尿液中的各种酶类和代谢产物,用于预测,诊断以及治疗监测,协助临床医生诊治疾病提供数据参考。1。3 按功能分为:肝功、血脂、肾功、心肌、代谢、免疫&风湿、离子&其他。1。4 试剂性能评价指标:1 试剂外观2 批间差3 准确度4 精密度5 线性(灵敏度)6 抗干扰能力(特异性)7 稳定性1.5 试剂检测原理(朗伯比尔定律):A=Kbc 式中,A 为吸光度;K 为吸收系数,是与入射辐射的波长及吸收物质的性质有关的常数 ;b 为液层厚度,单位为 cm;c 为吸收物质的浓度。当浓度的单位为 mol/L 时,K 的单位为 L/mol·cm,称为摩尔吸收系数,通常用 ε 表示。摩尔吸收系数 ε 表示物质对某一波长的辐射的吸收特性。ε 愈大,表示物质对某波长辐射的吸收力愈强,因而分光光度法测定的灵敏度就愈高。1.6 理论值与实测值偏差的解释:实测值偏离了朗伯比尔定律。偏离 Lambert-Beer 定律的因素:1 复合光对 Beer 定律的偏离:吸收定律要求入射光为单色光,而分光光度计单色光的纯度主要决定于色散元件及光路设计,即使高精度的仪器,也得不到纯单色光,而是波长宽度的复合光,其结果导致偏离 Lambert Beer 定律.2 杂散光的影响:杂散光(stray light) 是进入检测器待测波长以外的光。主要来源于仪器色散元件表面的散射、单色器内壁尘埃等。3 狭缝宽度的影响:单色器设有进、出口狭缝,狭缝愈窄,单色光愈纯,吸光度增加,但辐射能减小,对弱吸收带的测量有一定影响。定性分析时,为提高分辨能力常采纳较小的狭缝,而定量分析时,在灵敏度允许的情况下,宜采纳较大狭缝.当出、入射狭缝宽度相等时,狭缝宽度引起的误差最小。4 非吸收作用引起的误差:1。散射效应:光吸收定律只适用于均匀的吸收体系,如待测溶液是混浊的,当光通过时,将产生散射效应。其结果使光通过吸收物质的光程不固定,散射光的一部分和透射光一起进入检测器,导致偏离 Beer 定律。因此,免疫比浊法常用多点校准来做标准曲线。2. 荧光效应:分子吸收辐射能后产生的激发态分子以重新发射辐射的方式回到基态而发射荧光。由于多数显色体...

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