人用单克隆抗体质量控制技术指导原则本要点适用于供治疗的体内诊断用的利用杂交瘤技术制备的单克隆抗体，适用于在人体内应用的利用重复 DNA 技术制备的基因工程抗体 一、杂交瘤技术制备的单克隆抗体 （一）杂交瘤细胞 1．亲本细胞 (1）骨髓瘤细胞 SP2/0 或其他适宜的骨髓瘤细胞系。应为不合成或不分泌免疫球蛋白链型，具有符合骨髓瘤细胞的染色体特征，并有明确的来源历史及符合要求的保存条件。 （2)免疫亲代细胞 经抗原免疫的鼠脾 B 淋巴细胞或外周血 B 淋巴细胞。 应有明确的免疫原来源、性质及动物种系，免疫原详细的制备过程. 适宜的免疫方案及免疫淋巴细胞制备的方法. 2．细胞融合与克隆化 采纳适宜的方法进行融合、筛选及克隆化。 3．杂交瘤细胞检定 （1）抗体分泌稳定性 连续克隆化后抗体阳性率达100%，经体外连续传代 3 个月以上和反复冻存、复苏，细胞系能保持稳定分泌特异性抗体。 （2)细胞核学特征 检查细胞分裂中期染色体,应符合杂交瘤细胞特征。 4．鼠源病毒检查 按附录要求检测鼠源病毒。 5．支原体检查 按现行《中国药典》生物制品无菌试验规程进行. 6．无菌试验 按现行《中国药典》生物制品无菌试验规程进行. (二）单克隆抗体的检定 1．免疫球蛋白类及亚类 用免疫双扩散法或其他适宜的方法测定。 2．亲和力 用可靠、准确的方法测定单克隆抗体（以下简称为单抗）的亲和常数或相对亲和力。一般情况下，对于免疫原为可溶性的单抗，测其亲和常数，对于免疫原为颗粒性抗原的单抗,测其相对亲和力。 3．特异性 测定单抗对靶抗原的特异性；对多株单抗识别的抗原决定簇进行相关性分析。 4．交叉反应 按附录要求。 免疫组织化学法测定单抗与人体组织交叉反应，用冰冻及石蜡包埋的各种正常脏器组织测定。来源于肿瘤相关抗原的单抗应进行与各种肿瘤组织的交叉反应试验。 5．效价测定 用适宜方法测定. （三)其他原材料 1．细胞培育用小牛血清 支原体检测应为阴性。经小量试验适于杂交瘤细胞生长。 2．培育液 应有培育液来源，质量指标. 3．化学试剂 规格应达到分析纯以上。 二、基因工程抗体 参考《人用重组 DNA 制品质量控制技术指导原则》和本指导原则中的有关要求进行。 三、细胞库的建立应分别建立原始细胞库、主细胞库、工作细胞库的三级管理细胞库，一般情况下主细胞库来自原始细胞库、工作细胞库来自主细胞库。各级细胞库应有详细的制备过程、检定情况及管理规定等。 四、单抗...
