第1页共34页编号:时间:2021年x月x日书山有路勤为径,学海无涯苦作舟页码:第1页共34页第一章绪论细胞生物学的定义细胞生物学的三个研究水平我国基础科学发展规划中生命科学的四大基础学科:细胞生物学、分子生物学、神经科学、生态学当前细胞生物学的研究领域:1.细胞膜与细胞器的研究;细胞骨架体系的研究;细胞核、染色体及基因表达的研究2.细胞通讯和细胞信号转导3.细胞增殖及其调控4.细胞分化及其调控5.细胞的衰老与凋亡6.干细胞及其应用7.细胞工程第二章细胞的起源与进化从原核细胞到真核细胞的演进一、原核细胞(prokaryoctyt)1、结构——细胞壁、细胞膜、细胞质、荚膜特点:没有细胞核、无膜性细胞器DNA存在于拟核区,为双链环状,不与组蛋白结合细胞体积较小(1-10um)含有核糖体2、原核生物:支原体、细菌、放线菌、蓝细菌几乎所有的原核生物都是由单个原核细胞构成二、真核细胞(eukaryocyte)1、特点:有细胞核,核内含大部分DNA,有核膜可与细胞质分开胞质内有许多膜性细胞器,如内质网、高尔基复合体等体积比原核细胞大1000倍。有细胞骨架。2、真核细胞进化过程中的一个关键步骤是:膜性细胞器的出现。2、真核生物:单细胞生物(酵母、绿藻)、真菌、动、植物三、原核细胞和真核细胞的比较1、在基因组组成上有显著差异1)真核细胞含有更多的DNA,蕴藏更多的遗传信息。DNA呈线状,并包装成高度凝集的染色质结构。2)真核细胞的细胞器中也含有DNA3)真核细胞的mRNA在合成后,必须在核内剪接加工,然后运到胞浆中翻译成蛋白质。DNA转录与翻译分开进行。特征原核细胞真核细胞细胞结构核膜无有第2页共34页第1页共34页编号:时间:2021年x月x日书山有路勤为径,学海无涯苦作舟页码:第2页共34页核仁无有线粒体无有内质网无有高尔基复合体无有溶酶体无有细胞骨架无有核糖体有,70S有,80S基因组DNA量(信息量)少大DNA分子结构环状线状染色质或染色体仅有一条DNA,DNA裸露有2个以上DNA分子,DNA不与组蛋白结合,但可与少与组蛋白和部分酸性蛋白结合量组蛋白结合。以核小体及各级高级结构构成染色质与染色体。基因结构特点无内含子,无大量DNA重有内含子和大量DNA重复序列复序列。转录与翻译同时进行(在胞质内)核内转录,胞质内翻译转录与翻译后大分子的加工与修饰无有第三章细胞生物学的研究方法和手段第一节显微镜技术(microscopy)介绍几个相关概念:1、分辨率(resolution,也称分辨本领resolvingpower):区分开两个质点间的最小距离。2、极限分辨率:能清楚分辨出两点之间的最小间隔。数值越小,分辨本领越强。人眼的极限分辨率为100um,而动物细胞的大小在10-20um之间。一、光学显微镜:分辨率为0.2um(一)普通光学显微镜(lightmicroscope)1、应用最早、广。2、光源——自然光、灯光。3、最大放大倍数——极限放大倍数为500倍4、可见结构:细胞、细菌、细胞器(线粒体、细胞核等)、少数病毒。5、观察前的处理:固定、包埋、切片、染色。(二)荧光显微镜:分辨率高于普通光镜目前在光镜水平对特异蛋白质等生物大分子进行定性定位的最有力的工具。(三)相差显微镜技术1、特点:观察活细胞、未染色的生物标本避免在样品制作过程中细胞成分的丢失或失真。第3页共34页第2页共34页编号:时间:2021年x月x日书山有路勤为径,学海无涯苦作舟页码:第3页共34页2、应用:细胞培养中观察细胞的生长情况等。(四)激光共聚焦扫描显微镜(自学):分辨率是普通光镜的1.4倍。二、电子显微镜技术1、光源:电子束波长与电子运动快慢有关,越快,波长越短,分辨力越强。2、分辨本领高:3、可以观察:细胞的亚显微结构和生物大分子。4、样品制备复杂:需要真空;要求样品很薄,一般在数十纳米,要求有超薄技术。一般用重金属染色。5、常用的电镜透射电镜(TEM):观察细胞的微细结构扫描电镜(SEM):观察细胞表面的三维形态第二节细胞的分离和培养一、从组织中分离不同类型的细胞1、制备单细胞悬液:蛋白水解酶(胰蛋白酶、胶原酶EDTA:金属螯合剂机械方法2、分离出不同类型的细胞离心抗体偶联法流式细胞仪(FCM、flowcytometer):最精密的细胞分离技术3、生化分析或细胞培养...