—G↓GATCC——CCTAG↑G—用酶Ⅰ切割—GGATCC——CCTAGG—第1页共18页编号:时间:2021年x月x日书山有路勤为径,学海无涯苦作舟页码:第1页共18页1.(苏北四市2009届高三第三次调研考试)33.(7分)2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光,这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况,帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图,据图回答:(1)图中通过过程①、②形成重组质粒,需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。。②在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来,理由是:。(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多也最有效的方法是_______。(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上,GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因,其作用是。获得的转基因克隆猪,可以解决的医学难题是,可以避免。(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白,黄色荧光蛋白等,采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是:(用数字表示)。①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)④表达出蓝色荧光蛋白。33.(7分)(1)①②可以连接因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的(或是可以互第2页共18页第1页共18页编号:时间:2021年x月x日书山有路勤为径,学海无涯苦作舟页码:第2页共18页补的)(2)显微注射技术(3)为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因发生免疫排斥反应(4)②①③④2.(南通、扬州、泰州三市2009届高三第一次调研考试)31.(9分)降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA,过程如下图。在此过程中发现,合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题:(1)Klenow酶是一种________酶,合成的双链DNA有________个碱基对。(2)获得的双链DNA经EcoRⅠ(识别序列和切割位点-G↓AATTC-)和BamHⅠ(识别序列和切割位点-G↓GATCC-)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中,筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。①大肠杆菌是理想的受体细胞,这是因为它_________________________。②设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是___________________________。③要进行重组质粒的鉴定和选择,需要大肠杆菌质粒中含有_______________。(3)经DNA测序表明,最初获得的多个重组质粒,均未发现完全正确的基因序列,最可能的原因是_______________。(4)上述制备该新型降钙素,运用的现代生物工程技术是____________________。31.(9分)(1)DNA聚合酶126(2)①繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少(2分)②保证目的基因和载体定向连接(或防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接)(2分)③标记基因(3)合成的核苷酸单链仍较长,产生缺失碱基的现象(4)蛋白质工程3.(南京市2009届高三第—次调研测试)32.(8分)有性生殖的生物产生后代需进行受精作用,植物体细胞杂交要进行原生质体的融合,第3页共18页第2页共18页编号:时间:2021年x月x日书山有路勤为径,学海无涯苦作舟页码:第3页共18页单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合,可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程,据图回答相关问题:(1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一...