罗氏实时荧光定量PCR仪课件•实时荧光定量PCR技术简介•罗氏实时荧光定量PCR仪介绍•罗氏实时荧光定量PCR仪实验操作•罗氏实时荧光定量PCR仪的应用实例•罗氏实时荧光定量PCR仪的维护与保养目录contents01实时荧光定量PCR技术简介实时荧光定量PCR技术的定义实时荧光定量PCR技术是一种在PCR反应过程中,通过荧光信号的实时监测,对DNA或RNA进行定性和定量的分析技术。该技术利用荧光染料或荧光探针标记特异性检测PCR产物,通过荧光信号的累积实时监测PCR产物的变化,从而实现对起始模板的定性和定量分析。实时荧光定量PCR技术的原理在PCR反应过程中,荧光染料或荧光探针会与PCR产物结合,产生荧光信号。随着反应的进行,荧光信号会随着PCR产物量的增加而增强,通过实时监测荧光信号的变化,可以推算出起始模板的数量。通过比较不同样品在同一反应体系中的荧光信号强度,可以对样品进行相对定量分析。此外,通过设置标准曲线,还可以对样品进行绝对定量分析。实时荧光定量PCR技术的应用•实时荧光定量PCR技术在医学、生物学、农业和食品科学等领域有广泛的应用。例如,用于检测和诊断遗传病、传染病、癌症等;研究基因表达、基因突变和基因组学;以及用于食品安全检测和质量控制等。02罗氏实时荧光定量PCR仪介绍仪器的基本结构仪器外观操作界面罗氏实时荧光定量PCR仪外观为长方体,尺寸适中,便于实验室放置。仪器配备彩色触摸屏,操作界面友好,方便用户进行参数设置和实验操作。内部结构仪器内部包括加热模块、光学检测系统、电脑控制系统等部分,各部分协同工作完成PCR扩增和荧光检测。主要性能指标010203检测通道检测灵敏度温度控制仪器具备多个检测通道,可同时检测多个基因或样本,提高实验效率。仪器具有高灵敏度,可检测低至纳摩级别的荧光信号,确保实验结果的准确性。仪器采用先进的温度控制系统,确保PCR扩增过程中温度的准确性和稳定性。仪器的操作流程01020304实验准备实验设置开始实验结果分析准备好PCR反应液、引物和模板等实验材料,并按照说明书进行配置。在操作界面上设置PCR程序,包括变性、退火、延伸等温度和时间参数。将PCR反应液加入样品孔中,按下开始按钮,仪器自动完成PCR扩增和荧光检测过程。仪器将实验数据自动传输至电脑,用户可以使用相关软件对结果进行分析和解读。03罗氏实时荧光定量PCR仪实验操作实验前的准备仪器校准样品处理确保仪器在实验前已经完成校准,以保证实验结果的准确性。对样品进行必要的预处理,如DNA提取、纯化等,以便进行后续的PCR扩增。试剂准备仪器设置根据实验需求,准备适量的根据实验参数,设置PCR仪的反应条件,如温度、循环数等。PCR反应试剂,包括DNA模板、引物、dNTPs和Taq酶等。实验操作步骤PCR扩增实时荧光检测将准备好的反应液加入到PCR仪中,按照设定的条件进行扩增。在PCR扩增过程中,实时检测荧光信号的变化,以监控扩增进程。结果分析数据记录与整理根据荧光信号的变化,分析PCR扩增的结果,如CT值、溶解曲线等。详细记录实验数据,包括荧光信号的变化、扩增曲线等,并对数据进行整理和分析。实验后处理仪器清洁与保养数据审核与报告撰写实验结束后,对仪器进行清洁和保养,以保证仪器的使用寿命和准确性。对实验数据进行审核,撰写详细的实验报告,包括实验目的、方法、结果和结论等。样品处理总结与反思对实验中使用的样品进行妥善处理,以防止交叉污染和环境造成污染。对实验过程进行总结和反思,分析实验中存在的问题和不足之处,以便进一步提高实验质量和效率。04罗氏实时荧光定量PCR仪的应用实例在基因表达研究中的应用基因表达谱分析利用罗氏实时荧光定量PCR仪,可以对特定组织或细胞中的基因表达谱进行全面分析,了解基因在不同条件下的表达水平。差异表达基因筛选通过比较不同样本之间的基因表达数据,可以筛选出差异表达的基因,进一步研究其在生物学过程中的作用。基因表达调控机制研究通过实时监测基因转录水平的变化,有助于深入了解基因表达的调控机制,为相关疾病的研究和治疗提供线索。在病毒检测中的应用病毒载量测定123利用罗氏实时荧光定量PCR仪,可以快速、准确地测定病毒载量,为临床诊断和...