甘草酸的提取、分离及纯化实验甘草酸的性质及用途甘草为豆科植物的根，主要产于我国内蒙古、山西、甘肃、宁夏、新疆等地。甘草味甘，故又名甜草、蜜草。其主要化学成分有四类：三萜类、黄酮类、生物碱类及多糖类。其中三萜类成分有甘草酸、羟基甘草次酸等。甘草酸又称甘草皂苷、甘草甜素。白色结晶，可用冰醋酸结晶，有很强的甜味。分子式为C42H62O16，分子量为822.90。纯品为白色、无臭的结晶性粉末，熔点212～217℃，易溶于热水及热的稀乙醇，几乎不溶于无水乙醇或乙醚。甘草酸在植物中常以钙、钾、铵盐等形式存在。从甘草根为原料制得的甘草浸膏中提取的铵盐，其甜度为蔗糖的50～100倍，精制甘草酸钠、钾盐的甜度为蔗糖的200～300倍，是一种天然的甜味剂。甘草素入口后不能立刻感觉到甜味，而是逐渐才有感觉，并且一直延续很长时间还留有余味，因此甘草素与砂糖、葡萄糖等糖类复配，可以得到口感良好的甜味。因为它是非糖类、高甜度的甜味剂，因此没有褐变、吸湿及发酵等缺点。甘草素在医药上还可用作消化道溃疡治疗剂、解毒剂、消炎剂以及降血脂、抗动脉粥样硬化、降胆固醇等。目前，甘草素已广泛用于食品、医药、化妆品、饮料、卷烟等行业。我国甘草资源丰富，带皮甘草中含甘草酸7%～10%，去皮甘草中约5.5%～9.0%。甘草经溶剂浸取，可以制得甘草浸膏，再进一步加工可以制得甘草酸。1实验目的1.掌握甘草酸的提取原理和方法。2.掌握甘草酸的分离纯化方法。2实验原理甘草酸在原料中以钾盐或钙盐形式存在，其盐易溶于水，因此可用极性溶剂提取。提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。3实验材料、仪器和试剂实验材料：甘草实验仪器：电子分析天平（精确至0.001g）、移液管、紫外分光光度计、超声波清洗器、抽滤装置、水浴锅、旋转蒸发仪、容量瓶（10mL、25mL、100mL）试剂：70％的乙醇溶液、蒸馏水、硫酸（3.5mol/L）、浓氨水、25％氨水、冰醋酸、80%甲醇质量分数为70％的乙醇溶液（100mL）：用量筒量取75mL无水乙醇，25mL二次重蒸馏水于烧杯中，混匀；质量分数为10％的乙醇溶液（100mL）：用量筒量取12．5mL无水乙醇，87．5mL二次重蒸馏水于烧杯中，混匀；质量分数为0．5％的氨水溶液（100mL）：用量筒量取2mL25％氨水，98mL二次重蒸馏水于烧杯中，混匀；质量分数为0．5％的氨性醇溶液（100mL以无水乙醇为溶剂）：用量筒量取98．5mL无水乙醇，1．5mL25％氨水于烧杯中，混匀。4实验步骤4.1标准曲线的绘制准确称取甘草酸单铵盐25．0mg，用质量分数为70％的乙醇溶解至25．00mL，用移液管移取0．50，0．75，1.00，1．25，1．50mL，用质量分数为70％的乙醇定容至25．00mL.以质量分数为70％的乙醇为空白，在其最大吸收波长λ＝265nm处测定吸光度，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制浓度—吸光度标准工作曲线，其线性方程为A＝13．17C－0．017（C为甘草酸的质量浓度mg/mL，A为吸光度），相关系数r＝0．9994.2样品的测定用电子分析天平准确称取200．00mg、过60目尼龙筛的甘草粉末，分别加入50mL质量分数为70％的乙醇、质量分数为0.5%的氨性醇等提取溶剂，静置20min，将静置后的溶液用超声波清洗器超声90min的时间，过滤，取其滤液并用相应的溶剂洗涤滤渣3次，合并滤液并记录滤液的体积，并分别定容至100．00mL，用移液管吸取2．00mL，再次定容至10．00mL，摇匀待用。调节紫外分光光度计为工作状态：在仪器初始化检查好后，将预处理好的样品倒入比色皿中（比色皿预先用铬酸洗液浸泡1d），用相应的提取溶剂做空白，然后进行吸光度的测定。根据以下公式计算甘草酸的提取率：提取率＝（A＋0．017）×500÷（13．17×200．00）×100％，其中A表示待测溶液的吸光度。4.3甘草酸的分离纯化方法一：4.3.1甘草酸滤液预处理：甘草酸溶液减压浓缩，滴加3.5mol/l的硫酸至pH2～3，静置使之完全沉淀，离心，沉淀用去离子水洗2～3次，放入真空干燥箱中干燥，得甘草酸粗品。4.3.2甘草酸粗品进一步纯化:将棕黄色甘草酸粗品用一定量95%乙醇提取，提取液室温冷却，滴加浓氨水使pH至7-8，室温静置使沉淀完全。抽滤后得甘草酸三铵盐(TAO)沉淀物。不经干燥用4倍量(V/M)冰醋酸使之溶解，70℃...
