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-1-生物技术实践1.(2019年四川成都市七中二诊)成都七中的生物兴趣小组在寒假以“蛋白质的提取和分离”和“泡菜中亚硝酸盐含量的测定”为课题进行了研究性学习
分析并回答以下问题:(1)样品处理中红细胞的洗涤要用____________反复冲洗、离心
影响红细胞洗涤效果的因素包括_____________________________
(2)血红蛋白粗分离阶段,透析的目的是__________________,若要尽快达到理想的透析效果,可以___________________________(写出一种方法)
(3)蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率主要取决于__________________________因素
(4)装填凝胶色谱柱时,要注意色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现气泡必须重装
这是因为___________________________________
(5)亚硝酸盐的定量测定可以用________法,在制备样品处理液过程中加入氢氧化铝乳液的作用是______________________________
解析:(1)洗涤红细胞所用的溶液是生理盐水,根据渗透作用原理,将红细胞置于低渗溶液中,红细胞会吸水涨破,释放出血红蛋白
影响红细胞洗涤效果的因素包括洗涤次数、离心时间和离心速度
(2)血红蛋白粗分离阶段,透析的目的是除去样品中的小分子杂质;可通过增加缓冲液的量或及时更换缓冲液等方法缩短透析时间,能尽快达到理想的透析效果
(3)净电荷的多少和分子的大小可以决定蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率
(4)装填凝胶色谱柱时,要注意色谱柱内不能有气泡存在,气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果,一旦发现气泡必须重装
(5)测定亚硝酸盐的含量可以用比色法,在制备样品处理液过程中加入氢氧化铝乳液的作用是除去滤液