细胞生物学学习提要“细胞学说”的基本内容认为细胞是有机体,一切动植物都是由细胞发育而来,并由细胞和细胞产物所构成;每个细胞作为一个相对独立的单位,既有它“自己的”生命,又对机体整体的生命有所助益;新的细胞只能通过细胞分裂产生。细胞是生命活动的基本单位细细是构成有机体的基本单位细胞具有独立的、有序的自控代谢体系,细胞是代谢与功能的基本单位细胞是有机体生长与发育的基础细胞是遗传的基本单位,细胞具有遗传的全能性没有细胞就没有完整的生命细胞的基本共性◆由脂——蛋白体系的生物膜;DNA-RNA遗传装置;蛋白质合成的机器——核糖体一分为二的方式进行分裂原核细胞(prokaryoticcell)最基本的特点:①基因组——遗传信息量小,一个环状DNA②细胞内没有膜相结构,没有专门的细胞器和细胞核;主要代表:支原体(mycoplast)——最小最简单的细胞;细细蓝藻(又称蓝细菌)(Cyanobacteria)最小、最简单的细胞——支原体支原体(mycoplast)0.1~0.3μm,仅为细菌的十分之一具有细胞的特征:能在培养基上生长具有典型的细胞膜一个环状的DNAmRNA和核糖体一分为二的分裂繁殖方式真核细胞(eukaryoticcell)结构体系生物膜结构系统遗传信息表达系统细胞骨架系统原核细胞与真核细胞的主要差异特征原核细胞真核细胞形态结构细胞核拟核核膜、染色质、核仁、核基质内膜系统无内质网、高尔基体、溶酶体、分泌泡等线粒体、叶绿体无有细胞骨架无有细胞壁氨基糖、壁酸植物细胞——纤维素、果胶遗传结构和功能DNA1分子,几千基因2个以上,数万以上基因染色质裸露组蛋白、核小体、非组蛋白DNA复制无周期明显的周期性基因表达同时同地进行不同时段、不同区域大分子的加工无修饰细胞分裂无丝分裂有丝分裂、减数分裂植物细胞与动物细胞的比较细胞壁液泡叶绿体细胞形态结构的观察方法光学显微镜技术(LM)电子显微镜技术(EM):TEM&SEM扫描遂道显微镜(STM)几种显微镜观察样品大小的范围1cm1mm100um10um1um100nm10nm1nm0.1nm光学显微镜电子显微镜扫描隧道显微镜普通复式光学显微镜技术分辨率(D)是指区分开两个质点间的最小距离决定LM分辨率的三要素物镜镜口角(α)入射光波长(λ)界质折射率(N)荧光显微镜技术(FluorescenceMicroscopy)荧光显微镜的应用细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细细在光镜水平用于特异蛋白质的定性和定位;如绿色荧光蛋白(GFP)的应用光镜水平对特异蛋白质等生物大分子定性定位的最有力工具光学显微镜技术主要特点突出优点荧光显微镜样品进行荧光标记只有激发荧光可以成像激光共焦点扫描显微镜光通过一个小孔或裂隙后成像,只有焦平面能成像图像异常清晰,分辨率提高1.4~1.7倍相差显微镜“”增加一块相差板夸大样品密度相位差不需染色,可观察活体微分干涉显微镜棱镜折射,增加样品密度的明暗区别增加了反差,更具立体感暗视野显微镜黑背景下,利用散射光观察细胞及细胞器边缘轮廓清晰倒置显微镜照明系统与物镜颠倒位置增加集光器与载物台的距离,可观察培养容器录像增差显微镜计算机辅助微分干涉显微镜提高分辨率,可观察颗粒的运动光学显微镜与电子显微镜的基本区别光学显微镜电子显微镜分辨本领可见光:200nm紫外光:100n接近0.1nm光源可见光(波长400~700nm)紫外光(波长约200nm)电子束(波长0.01~0.9nm)透镜玻璃透镜电磁透镜真空不要求真空1.33×10-1~1.33×10-4pa成像原理利用样品对光的吸收形成明暗反差和颜色变化利用样品对电子束的散射和透射形成明暗反差电镜的限制:①不能观察活的生物样品;②难以观察细胞的全貌;主要电镜制样技术超薄切片技术用于电镜观察的基本样本制备负染色技术染色背景,衬托出样品的精细结构冰冻蚀刻技术冰冻断裂与蚀刻复型:主要用来观察膜断裂面的蛋白质颗粒和膜表面结构快速冷冻深度蚀刻技术(quickfreezedeepetching)电镜三维重构技术:电子显微术、电子衍射与计算机图象处理相结合扫描电镜样品处理①CO2临界点干燥法防止引起样品变形的表面张力②喷镀...