《蛋白质与酶工程》教学大纲课程名称:蛋白质与酶工程学分:学时:先修课程:生物化学适用专业:生物工程开课系部:生命科学学院一、课程性质、目的和培养目标课程性质:专业选修课课程目的:本课程是生物工程本科专业选修课,目的是让学生在学习了普通生化的基础上,进一步对蛋白质和酶工程进行深入系统的学习。并对于酶在生产实践中的应用,也能有一些感性和理性的认识。课程培养目标:采用多媒体课件和国内外最新的教学参考书、教案,灵活运用多种教学方法,因材施教,使学生在牢固掌握基础知识和基本概念的同时,得到科学研究、科学思维和科学方法的良好训练,为其他专业基础课和专业课的学习及日后的研究工作打下基础。二、课程内容和建议学时分配第一章绪论课时(一)教学基本要求掌握蛋白质工程和酶工程的定义,了解其发展史,以及应用前景。(二)教学内容第一节蛋白质工程概论第二节蛋白质工程的应用第三节蛋白质工程展望第四节酶工程简介-酶工程二组成:酶的产生;酶的分离纯化;酶的固定化;生物反应器。三分类:化学酶工程;生物酶工程。第五节酶与酶工程的发展简史一酶学研究简史二酶工程研究简史课课(三)教学重点和难点重点:蛋白质与酶工程定义难点:酶工程的组成分类第二章蛋白质的结构与功能(一)教学基本要求掌握蛋白质的基本结构组成及功能(二)教学内容第一节蛋白质的基本结构与功能-蛋白质的组成二蛋白质的一级结构三蛋白质一级结构与功能的关系第二节蛋白质的空间结构与功能-蛋白质的二级结构二超二级结构和结构域三蛋白质的三级结构四蛋白质空间结构与功能的关系五蛋白质蛋白质相互作用(三)教学重点和难点重点:蛋白质的空间结构;难点:蛋白质间的相互作用;第三章蛋白质的修饰和表达(一)教学基本要求掌握蛋白质的化学修饰途经,了解蛋白质改造的一些途经等。(二)教学内容第一节蛋白质修饰的化学途径-功能基团的特异性修饰多位点取代单一的或限制性取代二基于蛋習质片段的嵌合修饰第二节蛋白质改造的分子生物学途径-编码基因的专一性位点和区域性定向突变编码基因的专一性位点突变二基因融合和基因剪接三介导定点搀入非天然氨基酸第三节重组蛋白质的表达一目标蛋白质在大肠杆菌中的表达表达载体的一般特点与外源基因有效表达的相关因素二目标WWW的表达三重组蛋白质在哺乳动物细胞中的表达选择哺乳动物细胞表达体系的优点四噬菌体显鄴哺乳动物细胞表达系统(三)教学重点和难点重点:蛋白质的修饰和表达;难点:蛋白质间的修饰;第四章蛋白质的分离纯化及酶的分离工程课时(一)教学基本要求了解蛋白质和酶分离的一般过程、生物材料的处理方法,掌握酶的分析方法和分离纯化的方法、技术。(二)教学内容第一节蛋白质分析分离中的电泳技术第二节色谱技术及高效液相色谱第三节酶的分析法:酶活力测定、活力测定方法、酶法分析以及酶分离纯化的一般原则第四节细胞的破碎及酶的提取-生物材料的破碎:机械破碎法、物理破碎法、温度差破碎法、压力差破碎法、超声波法、化学破碎法、酶促破碎法二酶液的提取:盐溶液提取、酸溶液提取、碱溶液提取、有机溶剂提取第五节酶的纯化一调节溶解度的方法二根据酶分子大小、形状不同的分离方法三根据酶分子电荷性质的方法四根据专一性结合的方法五酶的结晶第六节酶纯度的检验第七节浓缩与干燥第八节酶的生产:生产方法、生产工艺、实例(三)教学重点和难点重点:蛋白质的分离及酶的分离;难点:酶的纯化与蛋白质的纯化;第五章酶与细胞固定化课时(一)教学基本要求了解细胞及原生质体的固定化、固定化酶的制备原则;掌握酶的固定化方法及常见酶的固定技术。(二)教学内容第一节固定化酶的定义及优缺点第二节固定化酶的制备原则及固定化方法-非共价结合法:结晶法、分散法、物理吸附法、离子键结合法二化学结合法:共价键结合法、交联法三包埋法:凝胶包埋法、半透膜包埋法四各种固定化方法的比较第三节固定化酶的性质及评价指标:稳定性、最适温度、最适值、底物特异性、酶活力、米氏常数。第四节辅酶的固定化及辅基的固定化,细胞的固定化,原生质体的固定化,固定化酶反应器,固定化酶的制备实例介绍:纤维素...