结核实验室诊断技术新进展-20140709VIP免费

14-7-111结核实验室诊断技术新进展中南大学湘雅医院刘文恩内容v结核病概述v结核检测新技术及临床应用v如何选择结核实验诊断方法结核病的历史纪元前一万年纪元前500年汉唐隋时代1650年命名结核1865年证实结核病具有传染性1882年发现结核菌1921年卡介苗1944年1908年结核菌素皮试链霉素1952年异烟肼1966年利福平1971年短程化疗1995年DOTS策略T-SPOT.TB策略2004年2010年全球结核病负担880万新发病例：110万HIV+人群结核病发病率：128/10万5个每年新发病例数最高国家：印度（200-250万）中国（91-120万）南非（40-59万）占全球病例的38%印度尼西亚（37-48万）巴基斯坦（33-48万）2010年全国第五次结核病流调数据患病率（1//10万）1979199020002010年活动性肺结核717523466459涂阳肺结核18713416966菌阳肺结核177216119肺结核症状：ü1031例活动性肺结核患者中，流调前出现肺结核症状的有740例（56.9%），无肺结核症状的有561例（43.1%）。ü186例涂阳肺结核患者中，流调前出现肺结核症状的有137例（73.7%），无肺结核症状的有49例（26.3%）。活动结核仅为冰山一角！还有潜伏性结核感染人群数量巨大——“定时炸弹”用药（免疫抑制剂等）免疫力降低（HIV等）基础疾病（糖尿病等）若想控制活动性TB，必须先控制潜伏性结核感染LatentTB-“hiddenepidemic”-2billionpeopleinfected潜伏性结核感染14-7-112ØLatentTBinfection：表现为结核菌素试验（TST）阳性，但无活动性结核临床表现，且病原学检查阴性Ø在免疫功能正常的人群中，其一生中有5-10%的可能发展为活动性结核Ø在合并HIV感染的人群中，每年发展成为活动性结核的危险性为5-15%，终身结核活动的可能性为90%潜伏性结核感染接触活动性结核病患者暴露程度不足，结核杆菌被机体免疫力清除-没有症状,结核杆菌仍旧存在而不能被侦测-X-光/CT扫描显示正常-没有抗体应答-诊断困难-传统的结核感染检测只有PPD机体被感染受免疫抑制没有临床症状终身处于感染状态潜伏感染有临床症状具有传染性-结核杆菌可以通过涂片、培养检测出-胸部的X-光或CT扫描显示异常-肺外结核难以诊断(特别是儿童)活动性结核5%5%再次激活潜伏性结核与活动性结核加速结核病发病率下降的主要途径DiagnoseandtreatactiveTBcases活动性结核病例的诊断和治疗Administeraneffectivevaccine使用有效的疫苗AddresslatentTB:diagnose/treatorvaccine阐明潜伏感染者：诊断/治疗或疫苗内容v我国结核病疫情v结核检测新技术及临床应用v如何选择结核实验诊断方法细菌学检查－－涂片、常规培养、快培其它辅助检查方法－皮试、结核抗体、PCR扩增目前诊断方法回顾Ø快速、直观、便宜Ø灵敏度低，104Ø检出率：低，漏诊率高Ø无法鉴别死活菌Ø只能鉴定到分枝杆菌属，需进一步鉴定涂片镜检法14-7-113Ø结核菌检验的金标准Ø检测周期超长：约8周Ø灵敏度：一般Ø各种分枝杆菌均能生Ø需进一步鉴定LJ培养法Ø液体培养Ø检测周期较长，但比LJ培养快Ø灵敏度：较LJ高，污染率较高Ø价格：专用仪器，专用试剂，价格高Ø各种分枝杆菌均能生长Ø需进一步鉴定快速培养检测法BDBACTECMGIT960培养系统BacTALERT3D培养系统液体变色培养基快培Ø特异性低：与卡介苗（BCG)和环境中的分枝杆菌会产生交叉反应。Ø敏感性低：在活动性结核中，只有75%-90%。在播散性结核，合并HIV感染，免疫低下，隐性感染中更低。Ø影响因素：年龄、卡介苗接种、免疫力、环境分枝杆菌、药物、操作人员等最普遍的结核感染检测方法，价格低但假阴性、假阳性多皮试（PPD,TST）涂片的缺点敏感性低异性差无法区别死菌与活菌需时久，4～8周阳性率低，约30～50%特异性差，无法区别MTB与NTM培养缺点目前诊断方法局限性PCR存在的问题存在假阳性和假阴性操作繁琐、技术要求高费用较贵，需特殊仪器设备抗原抗体检测缺点敏感性低特异性差皮试敏感性低特异性差目前诊断方法局限性2011年7月20日，世界卫生组织（WHO）发出正式声明，要求禁止将血清学检测方法（抗原，抗体，蛋白芯片等）用于肺结核和肺外结核的诊断。WHOwarnsagainsttheuseofinaccuratecommercialserological...