油菜苗期菌核病抗性鉴定VIP免费

实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定学习和初步掌握油菜苗期菌核病抗性鉴定技术方法。一、目的实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定实验室苗期菌丝接种鉴定法方法简单易行，鉴定周期短，不受自然环境影响，适于对大量材料的筛选。另据初步研究，苗期菌丝接种鉴定表现抗菌材料，在花期仍表现抗病。在本实验中只学习和掌握苗期菌丝块接种鉴定法。二、内容说明实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定（一）用品油菜不同品种种子（包括抗病品种如中油821，感病品种如84039的种子）、生长室、平底塑料盘（60×30×4cm）、园土、绿高一号液（北京北农绿高科技发展有限公司出产）、马铃薯、纱布、葡萄糖、琼脂胶、试管、三角瓶、解剖刀、接种环等。三、所需用品和操作方法实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定（1）土壤准备：取较肥沃的菜园土，清除石块，晒干敲碎，然后装入塑料盘中（需装满）。（二）、主要作法－－1.供试苗的种植实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定（2）油菜播种：保证出苗后能保留生长一致苗30株。每10个品种设对照。（二）、主要作法－－1.供试苗的种植实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定（3）土壤消毒：播种后用2000—3000倍的绿亨一号溶液浇透土壤进行消毒。（二）、主要作法－－1.供试苗的种植实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定（4）播后管理：播后将塑料盘放于生长室内，在出苗期间，室内温度控制在20℃以下，在出真叶后，控制20—24℃左右，每2天喷水一次。（二）、主要作法－－1.供试苗的种植实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定生长室实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定生长室外管理生长室外管理实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定（1）PDA培养基的制作：取马铃薯200g，洗净去皮切碎，加水1000mL，煮沸30min，用纱布过滤，将滤液加水补足到1000mL，加葡萄糖10—20g和琼脂胶17—20g，加热溶化，用纱布过滤。然后依需要，分别装入试管（用作贮藏菌种），或装入培养皿（用作培养菌丝接种菌），然后在高压灭菌锅内进行灭菌。（二）、主要作法－－2.菌丝的培养实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定（2）菌丝的培养：取贮存平板菌核病的菌丝，在无菌条件下移下装有PDA培养基的培养皿上，每皿一小块，放在培养皿中间，在22—25℃下培养3—4天，以菌丝长满，而又没有结核为宜。（二）、主要作法－－2.菌丝的培养实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定（1）接种：待油菜苗3—5片真叶时，将菌丝平板以无菌解剖刀切成0.5×0.5cm小块，将有菌丝的一面贴于叶片上（注意不要贴在叶脉上），每株接种1片叶，每叶接种1小块。见下图（二）、主要作法－－3.菌丝块的接种与管理实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定（2）管理：接种后在23—26℃温度和85%—95%相对湿度下培养5—7天后即可调查（注意接种后前2天相对湿度应保持95%以上，以确保发病，后3—5天保持85%左右，使接种菌不致于腐烂）。（二）、主要作法－－3.菌丝块的接种与管理实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定在试验中当感病品种的发病率超过40%以上方为有效鉴定。一般将病害等级分为5个等级，即：0级：无病。1级：病斑面积占接种叶面积10%以下。2级：病斑面积占接种叶面积10—30%。3级：病斑面积占接种叶面积30—50%。4级：病斑面积占接种叶面积50%以上。（二）、主要作法－－4.病害等级调查实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定（1）计算发病率（二）、主要作法－－5.统计方法和抗性分级标准实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定（2）计算病情指数式中：Gi为病害级别；Ni为调查株数；i为0、1、2…k,GK为最高级别。（二）、主要作法－－5.统计方法和抗性分级标准实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定（3）计算相对抗性指数（RRI）式中：m为供试材料；CK为对照。RRI，即Relativeresistantindex（二）、主要作法－－5.统计方法和抗性分级标准实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定（4）抗性分级标准：RRI≤-1.2≤-0.7<0≥0>0.9>2.0抗性分数高抗中抗低抗低感中感高感代号HRMRLRLSMSHS（二）、主要作法－－5.统计方法和抗性分级标准实验15油菜苗期菌核病抗性鉴定1...