江西省血液中心核酸检测经验介绍钱榕主要内容中心简介核酸检测实验室的设置及工作流程核酸检测实验室管理和检测关键控制点开站核酸检测情况江西省血液中心概况江西省血液中心于1984年成立，隶属省卫生厅管理的公共卫生事业单位。占地面积63.4亩，总建筑面积21788㎡,现有职工171人，供应省直13家医疗机构临床用血，2011年总供血量为23.8吨，并承担全省采供血机构质量控制与评价、业务技术指导、人才培训及血液相关的科研等任务。自2006年起，临床用血已实现100%来自于自愿无偿献血。成分输血达到99.8%。中心重视科研工作，致力从临床输血治疗和开展新技术治疗的需求出发，开展了血液去除白细胞、血浆病毒灭活等新技术。2010年4月份，中心与北京、上海、广州等12个省市15所采供血机构一道，被卫生部列为我国内地首批核酸检测试点单位。此外，中心先后开展了骨髓移植配血、器官移植配型(基因法)、产前血型血清学检测、新生儿溶血病检测、亲子鉴定(基因法)等研究工作。中心核心价值观忠诚履行输血使命精益服务健康人生中心环境标本交接离心区：用于核酸标本的接收、离心处理；设备：大容量低温离心机2台混样区：用于血液标本开盖、混样、以及质控品的加样；设备：全自动混样仪HAMILTONSTARIVD2台、生物安全柜1台、移动紫外车3台；提取扩增检测区：用于核酸的提取、PCR扩增和检测。设备：3套COBASAmpliPrep+COBASTaqMan®®、服务器1台、试剂暂存冰箱1台、移动紫外车3台核酸检测实验室的设置核酸检测实验室的设置实验室平面图检测系统：cobass201核酸血液筛查系统设备配置：2STAR+3CAP+3docking+3CTM试剂组成：cobas®TaqScreenMPXTest（96人份，一代）cobas®TaqScreenMPXControlKit（一代：6*6）cobas®TaqScreenWashReagent全血标本标本采集后4小时内进行离心处理。样本离心后先进行常规酶免检测，然后将酶免试剂阴性结果标本进行六混样核酸检测。如混样检测有反应性，再进行拆分检测。机采标本标本采集后4小时内进行离心处理；加样模式：六混样（1机采标本+5全血标本）核酸检测实验室工作流程核酸检测（酶免第一批阴性）23.0008.0009.0010.0011.0012.0013.0014.0015.0016.0017.0018.0019.0020.0021.0022.00核酸检测（酶免第二批阴性）核酸检测（酶免第三批阴性）酶免检测第一批2staffsStartNAT酶免检测第二批酶免检测第三批核酸检测如有阳性结果，当天进行拆分实验核酸检测实验室工作流程核酸检测阳性样本拆分实验03.0004.0006.0019.0020.0021.0022.0023.0024.0001.0002.001staff05.0007.00全部样本在48小时内出报告，符合卫生部核酸检测要求核酸检测实验室工作流程核酸检测的关键控制点—标本采血管的选择留样方式及注意事项运输过程中标本质量保证标本处理方式及细节解读标本检测核酸检测采血管的要求抗凝剂：首选EDTA和枸橼酸盐，避免使用肝素抗凝。无菌无DNA酶、无RNA酶：含分离胶的真空采血管；标本留取细节解读防污染留取人员的个人防护，留取前的清洁消毒，留取过程中保持密闭，防止其他可能污染物。充分混匀注意样品采集后的充分混匀，一般上下颠倒５次以上，如操作不规范，则容易出现凝块，给后续检测带来弊端：核酸检测出现凝块报错，引起人力、试剂等不必要的浪费，增加标本污染风险。标本量标本留取应检查是否足量，如量少，应更换采血管重新留取，杜绝开盖留取。NAT标本溶血及影响溶血：原因多为标本留取中机械作用致红细胞破裂引起，如标本留取不畅、留取速度过快等；另外，剧烈震荡也可引起溶血，如运输颠簸等溶血对NAT检测的影响：血红蛋白是核酸检测的主要抑制物之一，可抑制核酸检测；另外可核酸酶的释放加速核酸降解。如何避免溶血现象出现？标本留取时将血液顺管壁缓慢注入真空管中；另外避免震荡，以防血细胞破裂而溶血。NAT标本脂血及影响脂血是指血液标本采集后，经过离心处理，分离出来的血清中含有脂类物质。从外观上看，血浆呈浑浊的乳白色。脂血对NAT检测的影响：脂血易引起加样环节液面感应异常报错；高脂血标本可通过对荧光的屏蔽和吸收作用而干扰检测。如何避免留取脂血标本？应注意...
