1.探针：是分子杂交的必需工具，它是带有某种标记的一段碱基序列互补于待测基因序列的DNA或RNA或寡聚核苷酸2.克隆的无性繁殖：（DNACloning）基因的无性繁殖，克隆是从一群细胞中分离单一细胞，然后让其复制自己，产生许多完全相同的细胞。DNA克隆过程就是基因无性繁殖的过程，是黑牛技术。包括：制备基因选择载体基因与克隆载体重组重组DNA转化宿主细胞培养含有重组DNA的宿主细胞。3.PCR的概念及基本原理：聚合酶链反应，是一种体外扩增技术。以拟扩增的DNA分子为模板，以一对分别与模板5'端和3'端相互补的寡核苷酸分子为引物，在DNA-pol的作用下，按照半保留复制的机制沿着模板链延伸至完成新的DNA合成，重复这一过程，即可使目的DNA得以扩增。4.PCR是一种体外特异性快速扩增DNA的技术。PCR的特异性取决于一对人工合成的寡核苷酸，称引物。这一对寡核苷酸分别互补于待扩增DNA模版3‘端序列。待扩增DNA模版加热（94℃）变性和退火后，一对引物分别与两条单链模版的3’端序列特异性复性（60℃），在TaqDNA聚合酶催化下（72℃），从引物的5‘端向3’端延伸合成新的DNA链。从1个DNA分子产生2个DNA分子。这种变性----复性----延伸的过程称一个PCR循环。30-40次循环，DNA模版扩增数百万倍。5.基因工程：基因工程是指某种生物细胞的基因或人工合成的基因经重组后，引入另一种生物细胞，在此种细胞内大量合成该基因编码的蛋白质（或多肽），改变此种细胞的基因表型。基因工程是将目的基因与载体重组，通过转化宿主细胞，重组DNA在宿主细胞内自主复制和表达目的基因，表达产物分离纯化后形成基因工程产品。6.基因工程的基本过程：一、目的基因的制备二、载体DNA的选择三、目的基因和载体连接四、重组DNA分子转化宿主细胞五、克隆的分离和鉴定六、基因表达7.基因组基因库（染色体基因库）：首先制备核内大分子DNA，然后用限制性内切酶水解DNA，经选择后将需要的DNA片段与载体DNA重组，转化宿主细胞，制成基因库，称为基因组基因库。是代表一个物种全部基因组的重组DNA片段的集合。8.载体（vector）：是将外源目的基因导入宿主细胞，使外源基因在宿主细胞内复制和表达的一类DNA分子。载体可分为基因克隆和基因表达两类。9.载体的特点：（1）具有自主复制能力（2）有多个单切口核酸内切酶位点（3）有药物选择性遗传标志（4）在细菌内有较多的复制拷贝数（1.Originofreplication2.Selectablemarker3.Multiplecloningsite(MCS)）。10.限制性内切酶（Restrictionendonuclease）：能识别DNA分子内部特异性对称序列（通常为4-8个碱基对）并能在特定部位将其切开的一类酶。11.回文序列（Palindrome）：又称invertedrepeatsequence。是指核苷酸序列从5’到3‘在两条链上相同，又称倒置重复序列。12.基因工程中用到的酶：（1）限制性内切酶（2）DNA聚合酶Ⅰ（3）反转录酶（4）DNA连接酶（5）碱性磷酸酶（6）末端转移酶（7）TaqDNA聚合酶13.Charon噬菌体：λ噬菌体在其DNA的“非生活区”存在一些EcoRⅠ切口，用人工方法去除多数EcoRⅠ切口，留下单一EcoR切口，由此形成人工载体，称为Charon噬菌体。14.考斯质粒（cosmid）：是λ噬菌体cos部位的序列和质粒的重组体。15.基因克隆载体：主要用于扩增目的基因，即进行基因的无性繁殖，并不需要目的基因的表达。16.基因表达载体（expressionvector）：能表达外源目的基因并合成蛋白质的载体称表达载体。17.穿梭质粒载体：外源性基因插入混合型载体后既可在原核宿主细胞复制，也可在真核宿主细胞中表达。18.单核苷酸多态性（SNP）：所谓SNP就是在某一人群中的正常个体间的基因组DNA的某些位点的单个碱基对存在差别。有两种或两种以上的差别，我们可以把该位点用等位基因表示，即存在两种或两种以上的等位基因，最少的一种等位基因的出现频率不少于1%，这就称SNP。19.基因：是生物体遗传信息的基本单位，其本质是DNA，但有的生物基因组是RNA。编码一种有生物学功能的产物---蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称为基因。。按照这一概念，一个基因包括不仅是编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列，也包括为保证转录所必需的调控序列、5’和3’非翻译序列...
