论著文章编号:100025404(2003)0920760203次声作用下SD大鼠视网膜内皮素的动态表达王建洲,曹燕,惠延年,马吉献,邱萍(第四军医大学西京医院眼科,西安710032)提要:目的探讨内皮素在次声作用大鼠视网膜的动态表达。方法雄性SD大鼠放入次声舱,经16Hz、130dB作用2h,1次/d,分别于1、7、14、21d处死动物,取眼球作成病理切片。用免疫组化的方法,以未经次声作用的雄性SD大鼠作为对照,检测不同病理时期内皮素的不同表达部位。结果次声作用1d和对照组表现相似,均弱表达在视网膜和脉络膜血管;次声连续作用7、14、21d后,内皮素阳性表达部位明显变化;7d主要表达在视网膜的外段,而14d主要表达在内段,内核层和节细胞层阳性表达加强;21d视网膜各层表达下降。随着次声作用时间的延长,视网膜组织表现由外段向内段的损害。结论次声作用于视网膜后,内皮素表达在损伤部位的早期,可能为对损伤的一种修复反应。关键词:次声;内皮素;视网膜;免疫组化中图法分类号:R318.03;R322.91;R774文献标识码:AThedynamicexpressionofET21inretinaofSprague2Dawleyratsafterexposuretoin2frasoundWANGJian2zhou,CAOYan,HUIYan2nian,MAJi2xian,QIUPing(DepartmentofOphthalmology,XijingHospital,FourthMilitaryMedicalUniversity,Xi’an710033,China)Abstract:ObjectiveToexplorethedynamicexpressionofendothelin21(ET21)inretinaofSprague2Dawleyratsafterexposuretoinfrasound.MethodsMaleSprague2Dawleyratswereexposedtoinfrasoundof16Hz～130dBfor2heveryday.Theratsweresacrificedafterexposurefor1,7,14and21drespectively.TheexpressionofET21wasdetectedbyimmunohistochemistry.ResultsTheexpressionofET1inretinachangedafterexposurefor7,14and21d.ET21wasexpressedmainlyinouterretinalsegment(ORS)after7dandininterretinalsegment(IRS)af2ter14d.Withtheelongationofthetimeofexposuretoinfrasound,theinjuryinretinagraduallyextendedfromORStoIRS.TheexpressionofET21ofretinawasup2regulatedafterexposuretoinfrasoundandchangesrelatedtothepo2sitionofinfrasonicinjurywerefound.ConclusionET21,asakindofreactiontoinfrasonicinjury,isofprotectiveeffectontheretina.Keywords:infrasound;endothelin;retina;immunohistochemistry次声是一种广泛存在于周围环境、频率为010001～20Hz的不可听到的声波,可引起多种生物学效应[1～3]。内皮素(Endothelin,ET)是一种神经修复因子,在视神经损伤中表达增强[4]。但在视网膜次声损伤的作用却未见报道。本研究讨论内皮素在视网膜组织次声损害中的作用。1材料和方法111材料雄性SD大鼠25只,体质量200～250g,随机分为5组,每组5只,对照组不进行次声作用,实验组每日放于次声舱中基金项目:国家自然科学基金资助项目(39900162)作者简介:王建洲(1964-),男,河北省定州市人,硕士研究生,医师,主要从事视网膜脱落和眼外伤方面的研究。电话:(029)3375377收稿日期:2002212220;修回日期:2003202228以16Hz,130dB作用2h,分别于1、7、14、21d处死动物,摘取眼球,用40g·L-1多聚甲醛固定30min,4℃。经脱水、透明和浸蜡,制成5mm厚的切片,贴附于用多聚赖氨酸涂片的玻片上。次声压力舱及次声测量系统系本校西京医院与中国科学院声学所及航天工业总公司第41所协作研建。112方法①抗体和试剂:ET21兔抗鼠单克隆抗体、S2ABC试剂盒、DAB试剂盒(均为博士德公司提供)。②免疫组织化学染色:切片浸入715ml/LH2O22PBS,37℃,30min,封闭内源性过氧化物酶;正常羊血清封闭消除非特异性染色;滴加ET21兔抗鼠单克隆抗体(1∶200),湿盒4℃过夜,漂洗5min×3次;滴加生物素化鼠抗兔IgG(1∶200),湿盒37℃孵育30min;滴加SABC复合物,37℃孵育30min;DAB显色,显微镜下观察,水洗中止反应;苏木精复染,脱水,透明,封固。以未经次声作用的SD大鼠的视网膜作为对照,并设有PBS替代第一抗体的空白对照和正常羊血清替代一抗的替代对照。067第25卷第9期2003年5月第三军医大学学报ACTAACADEMIAEMEDICINAEMILITARISTERTIAEVol.25,No.9May.20032结果以未经次声作用的雄性SD大鼠的视网膜作为对照,ET21主要弱表达在视网膜血管和脉络膜...
