编号：W/0006-03-6-02-329修订状态：0修订日期：2011.12.28平皿菌落读数操作标准书1-5编号：W/0006-03-6-02-329批准：单连菊发布日期：2011.12.28审核：宋永皓修订状态：0编写：韩宾青岛啤酒股份有限公司TsingtaoBreweryCo.,Ltd技术标准修订日期：2011.12.28路径：技术标准/检验标准/平皿菌落读数操作标准书题目：平皿菌落读数操作标准书1.目的：为了准确评价啤酒生产过程中微生物的污染情况，微生物污染会对啤酒质量产生负面影响。2.范围：本标准适用于通过取样培养监控整个啤酒厂的微生物状况。3.相关文件和参考资料：3.1相关培养基、试剂的MSDS3.2《生理盐水配制操作标准书》3.3《体视显微镜操作标准书》3.4《显微镜操作标准书》3.5《过氧化氢酶实验操作标准书》3.6《纯生啤酒有害菌鉴定标准》3.7GB4789.2-2010菌落总数测定4.原理：微生物是肉眼看不见的，必需使用合适的培养基在适当的培养条件下让它们繁殖到肉眼可见的水平，以便评估。5.环境/安卫因素项目要素内容控制措施不含有毒药品的废培养基收集，交专门部门处理含有毒药品的废培养基分类收集，交专业公司集中处理。环境因素药品空瓶按相关药品的MSDS规定处置编号：W/0006-03-6-02-329修订状态：0修订日期：2011.12.28平皿菌落读数操作标准书2-5放线菌酮1、有毒2、在火焰中释放出刺激性或有毒烟雾1、配制储备液时在通风橱操作，并佩戴防护眼镜、防毒面具和耐腐蚀手套，穿防毒物渗透工作服；2、使用时佩戴防护眼镜和手套；3、一旦接触皮肤或眼睛，立即用自来水冲洗，根据接触程度，需要进行定期医疗检查；4、发生泄漏时不要冲入下水道，将溢漏液清扫入可密闭的容器中，小心收集残余物，然后转移到安全场所（额外个人保护：适用于有害颗粒物的P2过滤呼吸器）；5、严格密闭保存。其他注意事项参照放线菌酮的MSDS酒精1、易燃2、易挥发3、刺激性1、配制、使用时佩戴防护眼镜和手套。2、一旦接触皮肤或眼睛，立即用自来水冲洗。3、远离火种、热源，存放温度＜30℃。4、密封保存，与氧化剂、酸类、碱金属、胺类等分开存放。其他注意事项参照酒精的MSDS过氧化氢溶液1、强腐蚀性2、刺激性3、爆炸性强氧化剂4、助燃1、配制时在通风橱操作，佩戴防护眼镜、手套、口罩；2、使用时佩戴防护眼镜和手套；3、一旦接触皮肤或眼睛，立即用大量流动清水或生理盐水彻底冲洗至少15分钟；4、远离火种、热源，存放温度＜30℃，相对湿度＜75%；5、密封保存，与易（可）燃物和还原剂分开存放。其他注意事项参照过氧化氢的MSDS安卫因素触电正确使用各种电器，安全用电6.准备：6.1仪器和设备：名称最小分度值数量用途光源照明体视显微镜或放大镜1台观察菌落显微镜1台观察菌体计数器1个计数酒精灯1个火焰灭菌接种环（针）或无菌牙签若干从平皿取菌载玻片若干制作标本盖玻片若干制作标本无菌吸管或滴管若干移液镊子1把打火机1个点燃酒精灯6.2试剂：6.2.1酒精（75%）编号：W/0006-03-6-02-329修订状态：0修订日期：2011.12.28平皿菌落读数操作标准书3-5用1000ml量筒量取95%酒精750ml，再用蒸馏水补充至950ml，充分混匀。用酒精计对酒精进行标定，标定范围75±2%，记录标定结果。室温密闭贮存，有效期3个月。6.2.23%的过氧化氢溶液见《过氧化氢酶实验操作标准书》6.2.3无菌生理盐水见《生理盐水配制操作标准书》6.3标样/控制样：无6.4样品准备：无7.操作：7.1设备安装：无7.2仪器校准：无7.3操作程序与关键点提示：操作程序关键点提示可用肉眼观察，必要时用体视显微镜或放大镜，按规定的体积单位记录结果。好氧平皿1.从好氧培养箱中取出平皿。1．注意培养箱的温度。2.确定平皿上的细菌总数，可使用以下方法：平板有较大片状菌落生长时，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表平板菌落数。当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数。a．对平皿中各种菌落进行计数。b．平皿上菌落较多时，对平皿的一部分进行计数，然后乘以一个合适的因子，以确定平皿上细菌的总计数。b．平皿菌落数大于200时采用此方法。c．使用菌落计数器计数。3.按照指定的体积和格式记录结果。平板...
