摘要：建立一种以玻片为基质的蛋白芯片制备的优化及检定方法。将经过清洗处理的玻片，用不同浓度的氨基硅烷试剂和戊二醛试剂，在不同的时间内，进行氨基化和醛基化处理，通过蛋白结合强度与处理时间及溶剂浓度的动力学相关性分析，确定最佳的优化条件，将不同浓度梯度的人!"#抗体结合于该玻片表面，经过洗涤、封闭，再加入$%&荧光标记的二抗，孵育，洗涤后检测各点的荧光强度，确定其线性范围及其检测灵敏度。氨基硅烷试剂浓度为’(，作用时间为&)*+,-戊二醛试剂浓度为./’(0作用时间为1)*+,时0蛋白结合强度达到饱和。蛋白芯片在.2.3456*"7*8浓度范围内有良好的线性0能够检测出人!"#的最低浓度为.3459*"7*8。关键词：蛋白芯片-制备-氨基硅烷-戊二醛中图分类号:;9<文献标识码：=!"#$%$&$’()*#+,"-,".-.#$)’/)’0$#$)’)*.10,+20,(1.3331$0,*)-#+,"-)04/#$)’)*"-)#,$’/+$">!?#@A5B+,"<0?!CD+5*+,"<0$EF?G+5%A,<0HE=?#IJ,<0$=KEJ,"5L+J<0GMK@N5ODN,<0HEKMPJ+5QJ,<0G!=?#EAR<0G!?#HD+5"NA,"<0I=?#CDJ,"5S+.T?=芯片）的应用比蛋白芯片的应用要成熟，而蛋白芯片的应用则落后于基因芯片。基因芯片在研究基因表达、基因多态性以及检测基因突变方面具有不可替代的作用g<0.0&h。但是，细胞的各项功能机制是通过表达的蛋白来完成的，单独分析>?=和[?=并不能完全阐明各种生物机能，研究表明*[?=的检测风丰度与其相应的蛋白表达具有明显的差异性g40’h，并且蛋白质的翻译后修饰，蛋白与蛋白之间、蛋白与>?=之间的相互作用对细胞活动有重大影响。通过单独研究>?=和*[?=并不蛋白芯片生产用醛基化玻片制备的条件优化及初步检定丁亚平!"倪世明!"陈立炎!"张文!"曹恒杰!"罗予春!"周枚芬!"梁好!"凌志光!"王升启#T
