©1994-2009ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net作者单位:100853北京解放军总医院耳鼻咽喉科·耳科学·氨基糖甙类抗生素致聋家系线粒体DNA1555G点突变分析袁慧军姜泗长杨伟炎郭维维曹菊阳杨卫平戴朴【摘要】目的考察1555G点突变与氨基糖甙类抗生素致聋的对应关系,建立相应的基因诊断方法提供依据。方法收集了3个有明确氨基糖甙类抗生素应用史的母系遗传耳聋家系13人(包括聋人和听力正常者)的外周静脉血标本,聚合酶链反应扩增线粒体DNA,Alw26I限制性内切酶分析、DNA斑点杂交和DNA序列分析检测1555G点突变。结果家系1和3的7份样品均为1555G点突变阳性,家系2的6份样品为1555G点突变阴性。结论发现1个1555G点突变阴性的氨基糖甙类抗生素致聋家系,说明线粒体DNA1555G点突变不是氨基糖甙类抗生素遗传易感性唯一的分子基础。【关键词】听力障碍DNA,线粒体基因遗传学,生物化学抗生素类,氨基糖苷Screeningforthe1555GmutationinmitochondrialDNAinpedigreeswithaminoglycosideantibioticinduceddeafnessYuanHuijun,JiangSichang,YangWeiyan,etal.PLAGeneralHospital,Beijing100853【Abstract】ObjectiveToidentifytherelationshipbetweenthe1555GmutationinmitochondrialDNAandaminoglycosideantibioticinduceddeafnessandprovidetheoreticalevidenceforestablishingdiag2nosticmethod.MethodsBloodsampleswereobtainedfromthreepedigreeswithaminoglycosideantibioticinduceddeafness.DNAwasextractedfromtheisolatedleukocytes.ThemitochondrialDNAfragmentswereamplifiedbyPCR,1555GmutationwasdetectedbyAlw26Irestrictionendonucleasedigestion,allele2specificoligonucleotidehybridizationandDNAsequencing.ResultsSevenindividualsfrompedigreesAandCcarriedhomoplasmic1555Gmutation,sixindividualsfrompedigreeBdidnothave1555Gmutation.Conclusion1555GmutationisnottheonlypathologicmitochondrialDNAmutationassociatedwithamino2glycosideantibioticinduceddeafness.Thisisthefirstfindingofaminoglycosideantibioticinduceddeafnesspedigreewithout1555Gmutation.【Keywords】HearingdisordersDNA,MitochondrialGeneGenetics,biochemicalAntibiotics,aminoglycoside氨基糖甙类抗生素(aminoglycosideantibiotics,AmAn)具有严重的耳毒性副作用,可使患者发生不可逆转的听力损失。近年来研究发现部分患者有母系遗传家族史[1],并与线粒体DNA(mitochondrialDNA,mtDNA)12SrRNA基因第1555位A→G均质性点突变有关[2]。空间结构分析和细胞生物学研究进一步证实了1555G点突变在氨基糖甙类抗生素致聋(aminoglycosideantibioticinduceddeafness,AAID)病因学上的重要作用[3]。1555G点突变的检出为临床医生预测AmAn个体敏感性提供了可能性,1555G点突变阳性个体本人及其母系亲属应避免接触AmAn[4]。但目前分子遗传学研究还不清楚1555G点突变是否为AmAn致聋患者发病的唯一机理,1555G阴性者并不能排除对AmAn耳毒性高度敏感的可能性。本研究目的是考察1555G点突变与AmAn致聋的对应关系,并寻找与此种聋病相关的其它突变位点,为建立相应的基因诊断方法提供依据。本研究收集3个AAID易感家系,对患者及其母系家族成员的线粒体DNA进行1555G点突变分析,报道1个1555G点突变阴性的母系遗传AAID家系。材料与方法一、临床资料家系1(图1A)先证者Ⅳ23,女,山东籍,半岁时因肺炎注射硫酸链霉素4天,5个多月后出现听力下降。该家系健在的3代54人中18人有AmAn应用史,其中女性后代有15人在用药15天至5个月后都出现了不同程度的听力下降,男性后代有3人(Ⅲ7、Ⅲ8、Ⅲ9)有AmAn应用史,听力正常。·76·中华耳鼻咽喉科杂志1998年4月第33卷第2期©1994-2009ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net家系2(图1B)先证者Ⅲ4,女,湖南籍,7岁时因扁桃体炎注射庆大霉素约1周,1～2个月后听力开始下降。纯音测听双耳言语平均听阈为60～70dBHL,高频听力损害严重。其母及3个同胞兄长均为耳聋患者,且有明确的AmAn应用史。2个姨表兄也发...
