胆甾醇修饰的PEG-P[Asp(DET)]_miRNA复合物的制备、理化性能及细胞摄取能力VIP免费

书第二军医大学学报２０１４年２月第３５卷第２期ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ａｊｓｍｍｕ．ｃｎＡｃａｄｅｍｉｃＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｅｃｏｎｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｅｂ．２０１４，Ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．２·１７１·ＤＯＩ：１０．３７２４／ＳＰ．Ｊ．１００８．２０１４．００１７１·论著·胆甾醇修饰的ＰＥＧＰ［Ａｓｐ（ＤＥＴ）］／ｍｉＲＮＡ复合物的制备、理化性能及细胞摄取能力马志强１，２，刘赣１，高红军１，吴姗２，贾婷婷２，钟延强２，史林启１１．南开大学高分子化学研究所，天津３０００７１２．第二军医大学药学院药剂学教研室，上海２００４３３［摘要］目的制备疏水基修饰的聚阳离子高分子基因载体ＰＥＧＰ［Ａｓｐ（ＤＥＴ）］１０％胆甾醇，对其复合ｍｉＲＮＡ的理化性质和细胞摄取能力进行研究。方法开环聚合合成ＰＥＧＰ［Ａｓｐ（ＤＥＴ）］，再采用氯甲酸胆甾醇基进行疏水修饰，核磁共振法验证其结构；使其与ｈｓａｍｉＲ１５ａ形成胶束复合物，对该胶束复合物的粒径、Ｚｅｔａ电位、稳定性、包封率以及细胞毒性进行考察；以白血病细胞Ｋ５６２细胞系为模型细胞进行体外细胞实验对其摄取进行考察。结果合成的ＰＥＧＰ［Ａｓｐ（ＤＥＴ）］１０％胆甾醇具有良好的溶解性，可与ｍｉＲＮＡ形成稳定的胶束复合物，当氮磷比（Ｎ／Ｐ）＝２０，基因浓度在５μｍｏｌ／ｍＬ时，形成的胶束复合物粒径为（１９２．４±１０．８）ｎｍ，Ｚｅｔａ电位为（６．９±０．９）ｍＶ，包封率为（９０．５±３．２）％。该复合物在实验条件下表现出了相当的稳定性，细胞对该复合物的摄取能力明显强于商品化试剂脂质体ｌｉｐｏ２０００。结论ＰＥＧＰ［Ａｓｐ（ＤＥＴ）］１０％胆甾醇是一种优良的高分子基因传递系统载体，在体外实验中可有效实现细胞对于ｍｉＲＮＡ的稳定摄取。［关键词］高分子胶束复合物；聚乙二醇聚｛氮［氮（２氨乙基）２氨乙基］天冬氨酸｝；微ｍＲＮＡｓ；基因传递系统；基因疗法［中图分类号］Ｒ３４９．８［文献标志码］Ａ［文章编号］０２５８８７９Ｘ（２０１４）０２０１７１０６ＣｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｍｏｄｉｆｉｅｄＰＥＧＰ［Ａｓｐ（ＤＥＴ）］／ｍｉＲＮＡｃｏｍｐｌｅｘ：ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ，ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ａｎｄｃｅｌｌｕｌａｒｕｐｔａｋｅＭＡＺｈｉｑｉａｎｇ１，２，ＬＩＵＧａｎ１，ＧＡＯＨｏｎｇｊｕｎ１，ＷＵＳｈａｎ２，ＪＩＡＴｉｎｇｔｉｎｇ２，ＺＨＯＮＧＹａｎｑｉａｎｇ２，ＳＨＩＬｉｎｑｉ１１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰｏｌｙｍｅｒＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＮａｎｋａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔｉａｎｊｉｎ３０００７１，Ｃｈｉｎａ２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＳｅｃｏｎｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２００４３３，Ｃｈｉｎａ［收稿日期］２０１３０７１５［接受日期］２０１３０８２０［作者简介］马志强，硕士，助教．Ｅｍａｉｌ：ｂｒｉｓｋｂｒｅｅｚｅ＠１２６．ｃｏｍ通信作者（Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒｓ）．Ｔｅｌ：０２１８１８７１２８５，Ｅｍａｉｌ：ｙｑｚｈｏｎｇ＠ｓｍｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ；Ｔｅｌ：０２２２３５０６１０３，Ｅｍａｉｌ：ｌｑｓｈｉ＠ｎａｎｋａｉ．ｅｄｕ．ｃｎ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅＰＥＧＰ［Ａｓｐ（ＤＥＴ）］ｗｉｔｈ１０％ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍａｔｅｍｏｄｉｆｉｅｄｏｎｉｔｓｓｉｄｅｃｈａｉｎａｎｄｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓａｎｄｃｅｌｌｕｌａｒｕｐｔａｋｅｏｆｐｏｌｙｍｅｒｃｏｍｐｌｅｘＰＥＧＰ［Ａｓｐ（ＤＥＴ）］ｃｈｏｌｅ／ｈｓａｍｉＲ１５ａ．ＭｅｔｈｏｄｓＰＥＧＰ［Ａｓｐ（ＤＥＴ）］ｗａｓｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄｂ...