SCAP在培养肝细胞脂肪变性模型中的表达及意义VIP免费

A现在武警重庆总队医院消化内科工作400061A通讯作者·论著·SCAP在培养肝细胞脂肪变性模型中的表达及意义杨林辉A，陈东风!（第三军医大学大坪医院野战外科研究所消化内科，重庆400042）摘要：目的探讨油酸诱导的脂肪变性肝细胞模型固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白（srebpcieavageactivatingprotein，SCAP）的表达及意义。方法以正常肝细胞株L-02进行细胞培养，用油酸诱导建立肝细胞脂肪变性模型。采用油红0染色观察细胞内的脂滴，并检测细胞内甘油三酯含量，RT-PCR法检测SCAPmRNA的表达，Westonbiot检测SCAP蛋白的表达。结果油红0染色显示241开始出现脂肪变性，1201脂肪变性最重；模型组肝细胞内甘油三酯（TG）含量在各时相点较对照组显著升高，差异有统计学意义（P<0.01），1201增高最明显；模型组SCAPmRNA的表达上调，于241开始增高，721表达最强，与对照组相比差异有统计学意义（P<0.01）；SCAP蛋白的表达241开始增高，1201最强，与对照组相比差异有统计学意义（P<0.01）。结论油酸诱导的脂肪变性肝细胞模型SCAP的表达增强，细胞内TG的合成增加，SCAP可能参与了肝细胞的脂代谢及脂肪变性的形成。关键词：油酸；脂肪变肝细胞；甘油三酯；SCAP中图分类号：R575.5文献标识码：A文章编号：1671-8348（2007）08-683-03ExpressionandroleofSCAPinmodelsofculturedsteatosishepatocytesYANCLin-hui，CHENDong-feng（DepartmentofCastroenterology，InstituteofFieldSurgeryResearch，DapingHospital，ThirdMilitaryMedicalUniuersity，Chongging400042，China）Abstract：ObjectiveToexpioret1eexpressionandroieofSCAPint1emodeisofcuituredsteatosis1epatocytes.MethodsSteatosismodeisof1epatocyteswasestabiis1edbyaddingoieicacidtot1egrowingL-02ceiistrain.T1eexpressionofSCAPmRNAwasmeasuredwit1RT-PCRandt1eproteinexpressionofSCAPweremeasuredbyWesternbiot，iipiddropietsint1e1epatocyteswereobservedwit1oiiredstainingandt1econtentsoftrigiyceridein1epatocytesweremeasuredwit1anaiyzedkit.ResultsInmodeigroups，mRNAexpressionofSCAPincreasedat241，andeievatedremarkabiyat721comparedwit1t1enormaicontroigroup（P<0.01），andproteinexpressionofSCAPincreasedat241，andeievatedremarkabiyat1201comparedwit1t1econtroigroup（P<0.01）.Trigiyceridecontentsin1epatocytesoft1esegroupsaisoincreased.T1roug1oiiredstaining，afewiipiddropietswereobservedat241andsteatosis1epatocyteincreasedgreatiyat1201.ConclusionT1eoverexpressionofSCAPinmodeigroupscouidieadtodisturbanceofiipidmetaboiismandprobabiySCAPpar-ticipatest1eprocessofsteatosisof1epatocytes.Keywords：oieicacid；steatosis1epatocyte；trigiyceride；SCAP非酒精性脂肪性肝病（non-aico1oiicfattyiiverdisease，NAFLD）是一种无过量饮酒史，肝实质细胞脂肪变性和脂肪贮积为特征的临床病理综合征，其发病机制未完全明确。研究显示胰岛素抵抗、脂质代谢异常和线粒体功能障碍、氧应激及脂质过氧化损伤等多种因素参与了非酒精性脂肪肝的发病过程，其中脂质代谢异常被认为是最关键和基础的环节之一［1］。固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白（srebpcieavageactivatingprotein，SCAP）被认为是哺乳动物脂质合成和摄入的中心调节因子，在脂质代谢的平衡调节中起着非常重要的作用。研究表明人类SCAP基因遗传变异将会导致血浆脂质代谢改变和组织中脂质代谢紊乱［2］，SCAP异常是促成动脉粥样硬化的重要因素，而SCAP在NAFLD形成过程中的变化及作用鲜见报道。目前对NAFLD的研究主要采用的是动物模型，鲜有进行细胞模型的研究。本实验采用油酸诱导建立培养的肝细胞脂肪变性模型，并探讨SCAP在肝细胞脂肪变性形成过程中的作用。1材料与方法1.1主要试剂L-02肝细胞株购自中科院上海细胞所，胎牛血清（杭州四季青公司），山羊抗人SCAP多克隆抗体（SantaCruz公司），Trizoi（invotrigen公司），RT-PCR试剂盒（南京博大泰克公司），油红0（Sigma公司），甘油三酯检测试剂盒（南京建成生物研究所）We...