血糖实验室检测与比对临床生物化学实验室焦翔血清葡萄糖测定概述血液中的葡萄糖是人体的三大营养物质之一,是人体能量的主要来源,也是指导糖尿病病人用药的重要指标
应用酶学方法测定葡萄糖是临床化学中的主流方法
常用的酶法有葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法
这两种方法具有较高的灵敏度、准确度和精密度使用温和的反应条件,操作简单方便,适于自动分析仪
血清葡萄糖测定血糖检测的方法一、葡萄糖氧化酶法:本法的测定技术有极谱分析法和比色法两类
但二者的初始反应都是在葡萄糖氧化酶的催化下,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸,同时消耗溶液中的氧,产生过氧化氢
极谱分析发是用氧电极监测溶液中氧的消耗量
氧消耗量与葡萄糖浓度成正比
比色分析法是用葡萄糖氧化酶和辣根过氧化物的偶联反应系统
初始反应中过氧化物的生成量与葡萄糖浓度成正比
在辣根过氧化物酶催化下,过氧化氢和各种色原反应,生成有色化合物,可进行比色测定
该发的缺点是易受还原性物质如胆红素、抗坏血酸和尿酸等的干扰
血清葡萄糖测定二、己糖激酶法:第一步是在己糖激酶催化下,葡萄糖和ATP发生磷酸化反应,生成葡萄糖-6-磷酸;第二步是在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶催化下,葡萄糖-6-磷酸核NAD或NADP发生氧化还原反应,是生成6-磷酸葡萄糖酸和NADH或NADPH
在波长340NM处,监测吸光度的增高
吸光度的净增高值与葡萄糖浓度成正比
己糖激酶方法对葡萄糖的特异性高,不受尿酸和抗坏血酸的干扰
血清葡萄糖测定三、葡萄糖脱氢酶法:临床上不常用
己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法相比,已公认前者的测定特异性更好,特别适用于急诊检验使用
标本采集1
血清、血浆、脑脊液和尿液均为可接受的标本
标本置室温中,全血中葡萄糖将被分解代谢,大约每小时降低5%
因此采血后应立即离心,分离出血浆,置于干燥洁净试管中,待血浆凝结后在分离出血清,置2-8℃冰箱保存
至少可稳定三天以上