实验三浆膜腔积液粘蛋白定性试验【目的】掌握浆膜腔液粘蛋白定性(rivaltatest,李凡他试验)的方法
【原理】浆膜腔液漏出液中,只有微量的粘蛋白,李凡他试验为阴性
当炎症时浆腹腔上皮细胞被刺激,分泌粘蛋白增多
粘蛋白是一种酸性糖蛋白,等电点pH为3~5,因此,可在稀乙酸中出现白色沉淀
【操作】1.加试剂2.加标本3.观察结果4.判断结果5.报告方式【注意事项】1.血性浆膜腔积液经离心沉淀后,用上清液进行检查
2.器材与试剂(1)量筒的高度与蒸馏水的量要足够
(2)根据漏出液主要成分制备基础液,在其中加入不同量的粘蛋白作为阳性对照
(3)在量筒中加入冰乙酸及蒸馏水后应充分匀,否则会产生假阴性
3.pH保证pH3~5的酸碱度,加冰乙酸不宜过多,以免pH远离浆膜粘蛋白的等电点产生假阴性
4.结果判断(1)加入标本后立即在黑色背景下仔细观察结果
如浑浊明显,下沉缓慢,中途消失者为阴性
(2)标本中球蛋白含量增高时试验可呈假阳性,必要时可进行鉴别试验
实验方法:先将标本滴入未加冰乙酸的蒸馏水中观察,如有白色云雾状沉淀,此乃球蛋白不溶于水所致
5.结果分析常用于漏出液与渗出液的鉴别
漏出液常阴性,渗出液常阳性
6.本试验是一种初步的简易筛检试验,对区分渗出液与漏出液特异性意义不高