皮肤性病基本实验及操作技术项目一、真菌直接镜检法【适应症】头癣、体癣、股癣、手癣、足癣、甲真菌病、深部真菌病、着色芽生菌病、念珠菌病等钝刀、拔毛镊、载玻片、盖玻片、10％-20％氢氧化钾（钠）溶液、酒精灯、火柴、小片滤纸、显微镜。用品及准备钝刀、拔毛镊、载玻片、盖玻片、10％-20％氢氧化钾（钠）溶液、酒精灯、火柴、小片滤纸、显微镜。各种浅部、深部真菌病待检标本的准备。用钝刀刮取皮损边缘部的皮屑，或用小刀刮取变色松脆的甲屑，用拔毛镊拔取病发，置载玻片上，加1滴10%的KOH溶液，盖上盖玻片后在酒精灯上微微加热，待标本溶解，轻轻加压盖玻片使标本透明，然后在显微镜下观察。操作方法1．取标本少许置于载玻片上，滴1-2滴氢氧化钾（钠）溶液，加盖玻片。然后在酒精灯上微烘，加速角质溶解，但勿使沸腾。2．轻轻按压盖玻片，以滤纸吸取多余药液，然后镜检。检查时应遮去强光，先在低倍镜下观察有无真菌菌丝和孢子，然后用高倍镜观察孢子和菌丝的形态、特征、位置、大小和排列等。3.典型真菌镜检所见（1）花斑癣：短粗、两头钝圆、稍弯曲的菌丝，成堆的圆形或卵圆形厚壁孢子，有时有芽胞。（2）头癣①黄癣：黄癣痂，发内孢子、鹿角状菌丝，可见气沟、气泡。②白癣：断发外菌鞘由镶嵌或成堆圆形孢子组成。③黑癣：发内链状孢子。（3）体股癣、手足癣：分支分隔的长菌丝。（4）甲癣：分支分隔的长菌丝，常断裂为关节孢子样。（5）念珠菌病：假菌丝、圆形或椭圆形芽胞。（6）隐球菌病：圆形或椭圆形双壁孢子，外围有一层透光荚膜，在黑色背景下极为明亮。（7）着色芽生菌病：棕色圆形厚壁分隔孢子。（8）暗色丝孢霉病：棕色分支分隔菌丝或酵母样细胞。（9）链状芽生菌病：链状出芽孢子。（10）毛霉病：宽大菌丝，不分隔。注意事项1．拔毛镊或钝刀在使用前后均应火焰消毒并等冷却后使用。2．拔发时可用放大镜或在滤过紫外线灯下选择病发。3．镜检时所见菌丝或孢子应注意与纤维、表皮细胞间隙、气泡、油点等相鉴别。4．采取标本应保质、保量、防污染。几种深部真菌病标本镜检法①念珠菌病：皮肤、指甲或趾甲标本的检查方法同前；痰液或口腔粘膜损害标本涂片，可按皮肤标本处理后镜检，亦可用革兰染色法检查；②孢子丝菌病：直接镜检一般无诊断价值，应取脓液及病变组织作真菌培养；③着色真菌病：检查痂与脓液，方法同表皮真菌病，病原体为单个或成群的棕色厚壁分隔孢子；④隐球菌病：先在载玻片上滴一小滴优质墨汁（最好是印度墨汁），再取皮肤感染脓性物或脑脊液一滴，经接种环与之允分混合，盖上盖玻片，直接在显微镜下寻找荚膜厚壁圆形孢子。二、斑贴试验（patchtest）【适应症】接触性皮炎、职业性皮炎、手部湿疹、化妆品皮炎等。【用品】纱布、透明玻璃纸、橡皮膏、受试物【操作方法】根据受试物的性质配制适当浓度的浸液、溶液、软膏或原物作为试剂，置于4层1cm×1cm的纱布上，贴于背部或前臂曲侧的健康皮肤，其上用一稍大的透明玻璃纸覆盖，再用橡皮膏固定边缘。同时作多个不同试验物时，每两个之间距离应大于4cm。同时必须设阴性对照。【结果与临床意义】1．结果判定：24～48小时后观察。－：受试部位无任何反应；±：受试部位皮肤出现轻微瘙痒发红；+：受试部位皮肤出现单纯红斑、瘙痒；++：受试部位皮肤出现水肿性红斑、丘疹；+++：受试部位皮肤出现显著红斑、丘疹及水疱。2、临床意义阳性反应说明患者对受试物过敏，但应排除原发性刺激或其他因素所致的假阳性反应，假阳性反应者将受试物除去后，皮肤表现很快消失，而真阳性反应除去受试物后24～48小时内皮肤表现往往可增强。阴性反应则表示患者对试验物无敏感性。【注意事项】①应注意区分过敏反应及刺激反应；②阴性反应可能与试剂浓度低、斑试物质与皮肤接触时间太短等有关；③不宜在皮肤病急性发作期作试验，不可用高浓度的原发性刺激物作试验；④受试前2周和受试期间服糖皮质激素、受试前3天和受试期间服用抗组胺类药物均可出现假阴性；⑤如果在试验后72小时至1周内局部出现红斑、瘙痒等表现，应及时到医院检查。三、皮肤点刺试验【适应症】荨麻疹、湿疹等过敏性皮肤病【用品】一次性点刺针、变应...
