latJOphthalmol。V01．8．No．12，Dee．2008www．IJO．衄Tel：029-8224517283085628Email：IJO．2000@163．tom·实验论著·全反式视黄酸对体外培养人巩膜成纤维细胞的抑制作用崔冬梅，高岩，任亚琳，聂玉红，胡守龙，李传旭，曾骏文基金项目：中围国家自然科学基金资助项目(No．30572005)作者单位：(510060)中国广东省广州市，中山大学中山眼科中心中山大学眼科学国家重点实验室作者简介：崔冬梅，医学博士，讲师。通讯作者：曾骏文，教授，博士生导师，研究方向：屈光不正．zen9163net@163．corn收稿日期：2008—10-22修回日期：2008一11-06AII—transretinoicacidinhibitedhumanscleralfibroblastsproliferationandactivityDong·MeiCud，YanGao，Ya-LinRen，Yu-HongNie，Shou-LongHa，Chuan·XuLi，Jan-WenZengFoundationitem：NationalNatureSeieneeFoundationofChina(No．30572005)StateKeyLaboratoryofOphthalmology．Zhongshanor，hthalmieCenter，SunYat—senUniversity．Guangzhou510060，GuangdongPro—vince，ChinaCorrespondenceto：Jun·WenZeng．StateKeyLaboratoryofOph-thalmology，ZhongshanOphthalmicCenter，SunYat-$enUniversity，Guangzhou510060，GuangdongProvince，China．zen9163net@163．netReceived：2008-lO·22Accepted：2008-l1-06Abstract·AIM：T0ovaluatetheeffectsofall—transrctinoicacid(RA)onthemorphous，proliferation，activityandcellcycleofhumanscleraIfibroblasts(HSF)．·METHODS：PrimaryHSFwasculturedinvitro．ThedynamicmorphousandnumberchangesofHSFafterculturedwithdi仟erentconcentrationRAwereobservedunderlightmicroscopy．M"ITcolorimetricassaywasusedtoinvestigatetheeffectofRAonproliferationandactivityofHSF．CellcycleandapoptosisofHSFweredetectedbyflowcytometryanalysis(FCM)·RESULTS：ThenumberofHSFdecreasedandthecellsshank，disruptedandslendered。theinterspaceofcellsbecamewiderafterculturedwithdifferentconcentrationofRA．10pmol／LofRAcouldsignificantlyinhibittheproliferationofHSFinadosedependentandtimedependentmanner．TheresultsofFCManalysisshowedthatpercentageofHSFinG0／G1phasewasincreasedandthatofSandG2／MphaseweredecreasedwhenthecellswerestimulatedwithRAincomparisonwithcontroIgroup··CONCLUSION：RAinhibitsHSFgrowththroughdecreasingtheproliferationandDNAsynthesisofHSFinvitro．·KEYWORDS：retinoicacid；sclera：fibroblastsCuiDM，GaoY，RenYL，eta1．All-transretinoieacidinhibitedhumanscleralfibroblastsproliferationandactivity．／ntJOphthMrool(GuoyiYankeZazhi，2008；8(12)：2397-2400摘要目的：观察全反式视黄酸(a11．transretinoicacid，RA)对体外培养的人巩膜成纤维细胞(humanscleralfibroblasts，HSF)的形态、增殖能力和自我更新能力以及细胞周期的影响，探讨RA对巩膜成纤维细胞的作用。方法：原代培养HSF，波形蛋白和角蛋白对细胞进行鉴定。用不同浓度RA培养HSF，相差显微镜下动态观察其形态和数量变化；M1Tr法检测HSF在不同浓度RA培养后的细胞增殖和自我更新能力；FCM方法检测不同浓度RA对HSF细胞周期的影响。结果：MTT法显示RA对HSF有明显的抑制作用，该效应呈剂量依赖性反应。RA培养后HSF细胞数目减少，细胞收缩，突起减少，部分裂解，胞浆内有空泡和颗粒形成，细胞之间的间隙增宽，细胞变得细长，呈束状或不规则排列。FCM结果显示和对照组比较，随着RA浓度和时间的增加，G0／G1期细胞的比例逐渐上升，而s期和G2期细胞比例相应下降，细胞被阻滞在G0／G1期。结论：RA可抑制体外培养HSF的增殖和DNA合成。关键词：视黄酸；巩膜；成纤维细胞崔冬梅，高岩，任亚琳，等．全反式视黄酸对体外培养人巩膜成纤维细胞的抑制作用．国际眼科杂志2008；8(12)：2397-24000引言巩膜是一层由胶原纤维鞘和成纤维细胞构成的结缔组织，在眼球生长和重塑过程中起了重要的作用。巩膜组织结构的维持大部分依赖其主要成分一成纤维细胞的活性。近视眼患者的巩...
