第一章无菌操作技术实践第一节微生物的培养和应用第1课时培养基的配制与无菌操作和接种技术(时间：30分钟满分：50分)考查知识点及角度难度及题号基础中档稍难微生物培养基的配制268无菌操作和接种技术1、4、5综合考查3、7一、选择题(共5小题，每小题4分，共20分)1．细菌培养基常在121℃压力锅中灭菌。如果只是在100℃温度下将细菌培养基灭菌，下列生物仍会存活的是()。A．大肠杆菌B．一种青霉菌C．枯草芽孢杆菌D．沙门氏菌解析芽孢是为了抵御外界不良环境而形成的一种休眠体，100℃的温度不能将其杀死。答案C2．下列物质中，不能用作酵母菌培养基中碳源的是()。A．含碳有机物B．蛋白胨C．含碳无机物D．花生粉饼等天然物质解析酵母菌是异养型生物，只能利用有机物中的碳。答案C3．三个培养皿中分别加入10mL不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。培养36h后，计算菌落数，结果如表所示。下列选项错误的是()。培养皿培养基成分菌落数Ⅰ琼脂、葡萄糖35Ⅱ琼脂、葡萄糖、生长因子250Ⅲ琼脂、生长因子0A.该实验采用的是固体培养基B．该实验可采用涂抹平板法接种C．Ⅰ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长不需要生长因子D．Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要糖类解析培养基中均加入了琼脂，故为固体培养基；微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法或稀释涂布平板法；Ⅰ组和Ⅲ组存在两个变量，不能说明大肠杆菌的生长是否需要生长因子；Ⅱ组和Ⅲ组对照，自变量是葡萄糖的有无，说明大肠杆菌的生长需要糖类。答案C4．下列有关平板划线操作的叙述，不正确的是()。A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物B．每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种C．在第二次划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液D．划线结束后，灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者解析接种环取菌种前灼烧的目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线后残留的菌种；从第二次划线开始，每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端；划线结束仍需灼烧接种环，是避免细菌污染环境和感染操作者。答案C5．获得纯净培养物的关键是()。A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌B．接种纯种细菌C．适宜条件下培养D．防止外来杂菌的入侵解析防止外来杂菌的入侵是获得纯净培养物的关键。答案D二、非选择题(共30分)6．(10分)如下表所示为某微生物培养基的配方，请回答下面的问题。成分含量NaNO33gK2HPO41gKCl0.5gMgSO4·7H2O0.5gFeSO40.01g(CH2O)30gH2O1000mL青霉素0.1万单位(1)依物理性质，该培养基属于________培养基；依用途划分，则属于________培养基。(2)根据培养基原料，所培养微生物的同化作用的类型是________，培养的微生物可能是________。(3)该培养基中的碳源是________。不论何种培养基，在各成分都熔化后分装前，要进行的是________和________，搁置斜面时，一般需冷却至________左右，在________附近操作。解析(1)依物理性质，该培养基中未加凝固剂应属液体培养基；依用途，该培养基中加入了青霉素抑制了许多微生物生长，应属选择培养基。(2)由于该培养基中加入了有机碳源，故所培养的微生物应属异养型。(3)该培养基的碳源是(CH2O)；培养基熔化后需调节pH并灭菌；搁置斜面时，应冷却至50℃左右，操作应在酒精灯火焰旁进行。答案(1)液体选择(2)异养型真菌(3)(CH2O)调pH灭菌50℃酒精灯火焰7．(10分)根据所学的微生物知识回答下列相关的问题。(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑________、________和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、________、________等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行________(消毒、灭菌)；操作者的双手需进行清洗和________；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能________________________________________________________________________。(3)若用稀释涂布平板法...
