实验用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体(5年5考)(安徽卷，山东卷、江苏卷、……)[要点突破]1．实验原理(1)叶绿体呈绿色、扁平的椭球形或球形，不需染色，制片后直接观察。(2)线粒体呈无色，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等，用健那绿染成蓝绿色后制片观察。2．实验步骤(1)观察叶绿体↓↓(2)观察线粒体↓↓3．注意的问题线粒体和叶绿体观察实验的6个注意点(1)健那绿染液是专一性对线粒体染色的活体染料，可使活细胞中线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。(2)实验过程中的临时装片要始终保持有水状态。(3)要漱净口腔，防止杂质对观察物像的干扰。(4)用菠菜叶稍带叶肉的下表皮的原因：靠近下表皮的叶为栅栏组织，叶绿体大而排列疏松，便于观察；带叶肉是因为表皮细胞不含叶绿体。(5)叶绿体在弱光下以椭球形的正面朝向光源，便于接受较多的光照；在强光下则以侧面朝向光源，以避免被强光灼伤。(6)盖盖玻片时，一定要缓慢且与载玻片成45°夹角，盖玻片一侧先接触液滴，防止装片下产生气泡。[典例透析]【典例1】(·山东理综，6)只有在保持细胞活性的条件下，才能显示细胞中某物质或结构的实验是()。A．苏丹Ⅲ染色观察花生种子子叶细胞中的脂肪B．龙胆紫染色观察洋葱根尖分生区细胞的有丝分裂C．健那绿(詹纳斯绿B)染色观察动物细胞的线粒体D．甲基绿、派洛宁(吡罗红)染色观察动物细胞中的DNA和RNA解析依据题干中提供的信息“只有在保持细胞活性的条件下”来判断，选项A中不需要保持细胞活性；选项B中在用龙胆紫染色观察洋葱根尖分生区细胞之前需用盐酸和酒精混合液解离，此时细胞已被杀死；选项D中需用盐酸处理后再染色，故D中细胞也无需保持细胞的活性。答案C【典例2】(·江苏单科，10)将有关生物材料直接制成临时装片，在普通光学显微镜下可以观察到的现象是()。A．菠菜叶片下表皮保卫细胞中具有多个叶绿体B．花生子叶细胞中存在多个橘黄色脂肪颗粒C．人口腔上皮细胞中线粒体数目较多D．紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞中细胞核清晰可见解析当用光学显微镜观察时，可从菠菜叶片下表皮保卫细胞中直接观察到叶绿体，且呈绿色；细胞中的脂肪颗粒、线粒体和细胞核，本身不具有颜色，需经特殊染色处理后，才能够观察到。答案A规律总结玻片标本的制作适用于显微观察，凡需在显微镜下观察的生物材料，必须先制成玻片标本。常用的方法有：(1)压片法(如洋葱根尖细胞的有丝分裂)。压片的一般过程是：取材―→固定―→解离(对不易分散的材料用盐酸处理)―→漂洗―→染色―→压片―→观察。(2)装片法(如高倍镜下观察叶绿体和细胞质的流动)。其过程是：将材料在载玻片水滴中展平―→放盖玻片时应从一侧慢慢盖在水滴上，防止气泡产生―→对材料染色或改变溶液浓度―→观察。
