实验低温诱导植物染色体数目的变化(5年3考)(……福建,广东)[要点突破]完善实验原理、步骤和现象[动漫演示更形象见课件光盘]思维激活做低温诱导植物染色体数目变化实验时,实验的关键点及注意事项有哪些?提示1.选材(1)选用的实验材料既要容易获得,又要便于观察;(2)常用的观察材料有蚕豆(染色体较洋葱少故首选)、洋葱、大蒜等。2.试剂及用途(1)卡诺氏液:固定细胞形态;(2)改良苯酚品红染液:使染色体着色;(3)解离液[体积分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精混合液(1∶1)]:使组织中的细胞相互分离开。3.根尖培养(1)培养不定根:要使材料湿润以利生根;(2)低温诱导:应设常温、低温4℃、0℃三种,以作对照,否则实验设计不严密。4.固定用卡诺氏固定液(无水酒精3份∶冰醋酸1份或无水乙醇6份∶氯仿3份∶冰醋酸1份)是为了杀死固定细胞,使其停留在一定的分裂时期以利于观察。[典例透析]【典例】(福建理综,3)下列关于低温诱导染色体加倍实验的叙述,正确的是()。A.原理:低温抑制染色体着丝点分裂,使子染色体不能分别移向两极B.解离:盐酸酒精混合液和卡诺氏液都可以使洋葱根尖解离C.染色:改良苯酚品红溶液和醋酸洋红溶液都可以使染色体着色D.观察:显微镜下可以看到大多数细胞的染色体数目发生改变解析低温诱导染色体加倍的原理是抑制纺锤体的形成,使子染色体不能分别移向两极;卡诺氏液用于染色体的固定,解离液为盐酸酒精混合液;低温诱导染色体加倍的时期是前期,大多数细胞处于间期;改良苯酚品红溶液和醋酸洋红溶液都可以用于染色体的染色。答案C技法提炼低温诱导植物染色体数目变化的实验中的试剂及其作用试剂使用方法作用卡诺氏液将根尖放入卡诺氏液中浸泡0.5~1h固定细胞形态体积分数为95%的酒精冲洗用卡诺氏液处理的根尖洗去卡诺氏液与质量分数为15%的盐酸等体积混合,浸泡经固定的根尖解离根尖细胞,使细胞之间的联系变得疏松质量分数为15%的盐酸与体积分数为95%的酒精等体积混合,作为解离液解离根尖细胞蒸馏水浸泡解离后的根尖约10min漂洗根尖,去掉解离液改良苯酚品红染液把漂洗干净的根尖放进盛有改良苯酚品红染液的玻璃皿中染色3~5min使染色体着色[对点强化](原创题)用浓度为质量浓度为2%的秋水仙素处理植物分生组织5~6h,能够诱导细胞内染色体加倍。那么,用一定时间的低温(如4℃)处理水培的洋葱根尖(2N=16条)时,是否也能诱导细胞内染色体加倍呢?请对这个问题进行实验探究。(1)针对以上的问题,你作出的假设是______________________________。你提出此假设的依据是______________________________。(2)低温处理植物材料时,通常需要较长时间才能产生低温效应,根据这个提示将你设计的实验组合以表格的形式列出来。(3)按照你的设计思路,以___________________________________作为鉴别低温是否诱导细胞内染色体加倍的依据。为此你要进行的具体操作是:第一步:剪取根尖2~3mm。第二步:按照________→________→________的操作顺序对根尖进行处理。第三步:将洋葱根尖制成临时装片,在显微镜下用一个分裂期的细胞观察染色体加倍的动态变化过程。根据该同学的实验设计回答问题。该同学设计的实验步骤有一处明显的错误,请指出错误所在,并加以改正。_______________________________________。(4)该实验和秋水仙素处理的共同实验原理是___________。(5)若在显微镜下观察时,细胞中染色体数可能为_________________。答案(1)用一定时间的低温处理水培的洋葱根尖,能够诱导细胞内染色体加倍低温能够影响酶的活性(或纺锤丝的形成、着丝点的分裂),使细胞不能正常进行有丝分裂(2)培养温度/℃5101520常温40注:设计的表格要达到以下两个要求:①至少做两个温度的对照;②间隔相等的培养时间进行取样。(3)在显微镜下观察和比较经过不同处理后根尖细胞内染色体的数目解离漂洗染色细胞已被杀死,在第三步中不能再观察染色体加倍的动态变化(4)抑制纺锤体的形成,染色体不能被拉向细胞两极,结果染色体数目加倍(5)2N=16、4N=32、8N=64(加倍后的细胞有丝分裂后期)