性别鉴定计 VIP免费

性别鉴定计篇一：性别鉴定PCR性别鉴定实验摘要：人类y染色体上特异性重复序列（humany-chromosomespecificrepetitiveDNAfamilysequence）是一种重复性很高的特异性序列，引物能在人类广大的基因组中对它进行特异性识别，因此，它是良好的PCR材料。本实验通过对人黏膜细胞的DNA提取、基因组DNA制备、PCR扩增y染色体上特异性重复序列、PCR产物的电泳检测的方法实现人的性别鉴定。通过此次实验，我们得到了预期结果，只有极少数因实验操作等人为失误导致实验与预期不符的情况发生，总之，用PCR技术扩增y染色体上特异性重复序列的方法是可靠的。关键词：基因组DNAPCRy染色体上特异性重复序列电泳检测引言PCR（PolymeraseChainReaction）又称聚合酶链式反应，它是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行比对。鉴定性别方法有很多，巴氏小体观察法、染色体分型技术都可以对人的性别进行鉴定，但是染色体分型需要专门的技术和人才，巴氏小体鉴定人的性别准确率低，而且无法鉴别XXY、X0核型的性别。而PCR的方法操作简单，准确率高。由于Y染色体是区分性别的本质，PCR可以很简便地从基因组DNA中直接获得Y染色体DNA进行分析鉴定。本实验就是通过PCR技术扩增y染色体上特异性重复序列来实现性别鉴定。此资料由网络收集而来，如有侵权请告知上传者立即删除。资料共分享，我们负责传递知识。人类及哺乳动物的性别决定和分化是一个复杂的过程，涉及已知和未知的多个基因。SRY基因是人类及已知许多哺乳动物中一段Y染色体特异的保守序列，人类SRY编码区全长615bp。该基因的突变将导致XY染色体女性化（特纳氏综合征）；而含有该基因的染色体片段如果易位到X染色体，则导致XX男性综合征。但是由于人类的基因组太大，有700多MB,引物要从700多MB的序列中识别615bp的序列十分困难，因此，本实验选取的是一种更容易被引物识别的序列——y染色体上特异性重复序列（humany-chromosomespecificrepetitiveDNAfamilysequence）来进行PCR扩增。电泳是带电物质在电场中向着与其电荷相反的电极移动的现象。各种生物大分子在一定pH条件下，可以解离成带电荷的离子，在电场中会向相反的电极移动。凝胶是支持电泳介质，它具有分子筛效应。含有电解液的凝胶在电场中，其中的电离子会发生移动，移动的速度可因带电离子的大小、形态及电荷量的不同而有差异。利用移动速度差异，就可以区别各种大小不同的分子。因而，凝胶电泳可用于分离、鉴定和纯化DNA片段，是分子生物学的核心技术之一。综上，本实验通过对人口腔黏膜细胞的DNA提取、基因组DNA制备、PCR扩增y染色体上特异性重复序列、PCR产物的电泳检测的方法实现人的性别鉴定，取得了良好的效果。正文1.材料和方法1.1材料和试剂实验材料：人口腔黏膜细胞实验试剂：ddH2O、10×Buffer、dNTP(2.5mMeach)、PrimerF(10μM)、PrimerR(10μM)、Taq酶（5U/μL）、TAE、EB、agarose,etc.实验仪器：离心机、水浴锅、涡旋振荡器、微量移液器、不同类型的此资料由网络收集而来，如有侵权请告知上传者立即删除。资料共分享，我们负责传递知识。枪头、1.5mLEp管、金属浴锅、制胶槽、制胶板、样品梳等1.2实验方法1.口腔上皮细胞DNA样品制备（1）取一高压过的Ep管，做好标记；（2）取60μL细胞裂解液至一个Ep管中；（3）先用水漱口，然后用消毒牙签（钝头）刮取口腔上皮，弃去第一次刮取物，保留第二刮取物；（4）将消毒牙签（钝头）放于Ep管细胞裂解液中快速转动，释放细胞；（5）50℃水浴锅保温20min。（6）在等待过程中建立PCR反应体系。即取一个干净的PCR管，在冰浴中，依序加入表1中的成分（除了模板以外其他都加好）。另外要设置阴性对照和阳性对照。阴性对照不加模板，阳性对照加入男性基因组DNA。（7）95℃金属浴保温除模版外PCR反应体系10min。（8）12,000rpm离心除模版外PCR反应体3min，获得DNA溶液。（9（10）将样品放入PCR仪中，按...