专题38克隆技术及生物技术的伦理问题【高频考点解读】(1)植物的组织培养(Ⅱ)(2)动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅰ)(3)细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)(4)生物技术中的伦理问题(Ⅰ)【热点题型】题型一植物细胞工程例1、“—”如图所示为科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育番茄马铃薯植株的过程，请回答下列问题。(1)①②过程使用了__________酶，为使植物原生质体相互分离，此处使用的溶液浓度较大，以保证植物细胞会发生__________，以保护原生质体不被破坏；在动物细胞培养技术中，使细胞分离开来的酶是__________。(2)过程③在化学药剂________的作用下会发生细胞融合；动物细胞融合的方法与植物细胞不相同的是________。(3)过程__________属于脱分化，过程__________属于再分化，细胞发生分化的根本原因是__________。(4)过程⑤⑥⑦的细胞工程技术是__________，其培养时选用的材料通常是分生组织，原因是__________。(5)植物体细胞杂交的研究在________方面，取得了巨大突破。解析本题考查植物体细胞杂交的有关知识，意在考查考生的综合运用能力。(1)①②过程使用含有纤维素酶和果胶酶的高浓度溶液处理植物细胞，使植物细胞发生质壁分离，从而保护原生质体不被破坏。在动物细胞培养技术中，使细胞分离开来的酶是胰蛋白酶。(2)过程③是诱导原生质体融合，常用的化学促融剂是聚乙二醇，而用灭活的病毒促进细胞融合是动物细胞融合特有的方式。(3)⑤过程为脱分化，⑥过程为再分化，愈伤组织在细胞增殖过程中，由于基因选择性表达形成具有根、茎、叶的植物体。(4)过程⑤⑥⑦为植物组织培养过程。植物组织培养时，由于分生组织细胞分裂旺盛、全能性高，因此常作为组织培养的材料。(5)植物体细胞杂交可以克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍，实现不同物种间的基因交流。答案(1)纤维素酶和果胶质壁分离胰蛋白酶(2)聚乙二醇可以使用灭活的病毒(3)⑤⑥基因的选择性表达(4)植物组织培养全能性高，易培养形成愈伤组织(5)克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍【提分秘籍】一、植物组织培养及细胞全能性1．操作流程及培养条件(1)操作流程CombinCombinCombin(2)培养条件：营养物质(水、无机盐、蔗糖、氨基酸和有机酸等)、激素(如细胞分裂素、生长素等)及其他条件(无菌、适宜的温度和pH等)。【特别提醒】①幼嫩的组织脱分化较为容易，如茎尖、根尖、形成层细胞易脱分化，而植物的茎、叶和成熟的组织则较难。②对外植体要进行消毒处理，而对各种器械要彻底灭菌。③植物组织培养中用到的有机碳源一般为蔗糖，用葡萄糖也可以，但后者的成本高。④诱导愈伤组织再分化形成胚状体或丛芽及生根的过程中，要进行换瓶处理，以改变培养基中的激素配比及浓度。2．脱分化和再分化的比较比较内容脱分化再分化过程→外植体愈伤组织→愈伤组织幼苗形成体特点排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞有根、芽需要条件a.离体b.适宜的营养c.生长素/细胞分裂素的比例适中d.不需光a.离体b.适宜的营养c.生长素/细胞分裂素的比例高或低诱导生根或生芽d.光照【特别提醒】①愈伤组织再分化形成植物幼苗时，需光照处理，以便诱导叶绿素的形成。②生长素和细胞分裂素在植物体内含量很低，因此植物组织培养中常用人工合成的生长素类似物和细胞分裂素类似物。细胞分裂素/生长素的比例适中，有利于外植体脱分化，比例升高有利于愈伤组织再分化形成丛芽，比例降低则有利于生根。3．原理高度分化植物细胞仍然具有全能性。二、植物体细胞杂交1．技术操作流程图2．原理及过程解读(1)植物体细胞杂交的障碍①植物细胞都有细胞壁。根据酶的专一性原理，用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。②原生质体融合。人工诱导方法包括物理法，如离心、振动、电激；化学法，如聚乙二醇(PEG)诱导等。(2)杂种细胞的类型有三种：AA、BB、AB，符合要求的只有AB，需要进行筛选。(3)杂种细胞AB形成的标志：新的细胞壁的生成。(4)杂种植株遗传物质的变化：细胞融合属于染色体变异，杂种植株的染色体数通常是两亲本细胞染色体数目之和，形成异源多倍体。(5)植物体细胞杂交的原理：原生质体融合的过程利用了细胞膜的流动性，杂种细胞发育成杂种植株利用了细胞的全能性。【...
