专题2微生物的利用学之趣兴趣是最好的老师基础梳理一、培养基1．概念：人们按照微生物对________的不同需求，配制出的供其________的营养基质。2．营养构成一般都含有________、________、氮源、________，还需满足不同微生物对pH、____________以及O2的要求。营养物质生长繁殖水碳源无机盐特殊营养物质思考1为什么倒平板后等平板冷却后要将平板倒置？【答案】将平板倒置的目的是防止培养皿盖上的水珠滴落到平板上造成污染。二、无菌技术1．消毒(1)特点：使用较为________的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体__________________(不包括芽孢和________________)。(2)常用方法：煮沸消毒法、__________、化学药剂消毒法。温和有害的微生物孢子巴氏消毒法2．灭菌(1)特点：指使用强烈的理化因素杀死物体内外______________包括芽孢和孢子。(2)常用方法：________灭菌、干热灭菌、________灭菌、紫外线消毒。所有的微生物灼烧高压蒸汽三、微生物培养的基本技术1．配制培养基：称量→混合→溶化→调pH→分装→包扎。2．灭菌：加水→加培养基→密封→排冷气→维持压力→取出倒平板(或搁置斜面)。3．接种(1)接种过程：洗净双手→点燃酒精灯→接种→贴标签。(2)接种工具：包括________、涂布器。(3)接种方法：平板划线法、______________法。(4)注意事项：整个操作过程都要在_____________旁完成。4．培养：接种后的培养皿放入恒温箱内培养。接种环稀释涂布平板酒精灯火焰思考2平板划线法为什么要在第一次以后的每一次划线的起点放在上一次划线的末端？【答案】目的是使每一次划线后菌体数目减少，培养之后形成的菌落是由单个菌体繁殖而成。四、菌种保藏1．临时保藏(1)操作：采用________培养基，菌落长成后，放入________冰箱中保藏，以后每3～6个月，转移一次新的培养基。(2)缺点：保存时间________，菌种易被________或产生变异。2．长期保存法：________法，放在－20℃下保存。固体斜面4℃不长污染甘油管藏五、土壤中分解尿素细菌的分离与计数1．菌种筛选(1)培养基：__________。(2)特点：________是唯一氮源。2．统计菌落数目(1)计算方法①________________。②________________。(2)平板计数公式：_____________________。选择培养基尿素稀释涂布平板法显微镜上计数CV×M3．设置对照(1)对照实验：是指除了______________外，其他条件都相同的实验。(2)主要目的：排除实验组中______________对实验结果的影响。被测试的条件非测试因素六、分解纤维素的微生物的分离——纤维素分解菌的筛选1．土壤取样：选择富含________的环境。2．将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上(1)制备鉴别培养基：主要碳源____________。(2)刚果红染色法①先培养________，再加入刚果红进行颜色反应。②________时加入刚果红。纤维素CMC—Na微生物倒平板讲之道点线面构建知识链考点一培养基考点归纳1.培养基的分类①按培养基的物理性质分为a．液体培养基：配制成的液体状态的基质，一般用于生产。b．固体培养基：在液体培养基中加入凝固剂(如琼脂)，配制成的固体状态的基质，琼脂固体培养基是实验室中最常用的培养基之一，常用于菌种的分离与鉴别。②按培养基的用途可分为选择培养基与鉴别培养基培养基种类特点用途选择培养基培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物(如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；用尿素为惟一氮源的培养基用于分离分解尿素的细菌)鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物，如可用刚果红鉴别出是否含纤维素酶的菌落。2.无菌技术(1)消毒和灭菌的区别条件结果常用的方法消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌(2)无菌技术主要操作要求①实验前应对操作空间、操作人员消毒，对所用器具和培养基灭菌。②实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区...
