基因工程知识点VIP免费

名词说明 1.基因工程：是将目的基因或DNA 片段与适合的载体连接转入目标生物细胞，通过复制、转录、翻译外源目的基因和蛋白质的活性表达，使转基因生物取得新的遗传性状的操作。 2.限制性内切核酸酶：能够识别双链DNA 分子中的某一段特定核苷酸序列，并在此切割DNA双链的内切核酸酶。 3.同切点酶：又称同裂酶，是一类来源于不同微生物、能识别相同DNA 序列的限制性内切核酸酶。 4.同尾酶：是一类限制性内切核酸酶，它们来源各异，识别的靶序列也各不相同，但切割后 能产生相同的黏性结尾。 5.酶的星号活性（Star activity）：高浓度的酶、高浓度的甘油、低离子强度、极端pH 值等，会使一些核酸内切酶的识别和切割序列发生低特异性，即所谓的酶的星号活性现象。 连接酶：是能催化双链DNA 片段靠在一路的3’羟基结尾与5’端磷酸基团结尾之间通过形成磷酸二酯键，使两结尾连接的一种核酸酶。 7.载体：在基因克隆中能携带外源基因进入受体细胞复制、整合或表达的工具称为载体。 8.多克隆位点：是包括多种同一个限制性酶切点的一段很短的 9. 互补：为质粒DNA 编码β—半乳糖苷酶的亚基，宿主细胞可编码β亚基尽管宿主和质粒编码的片段各自都没有酶活性，但它们能够融为一体，形成具有酶学活性的蛋白质，这种互补现象叫互补。 10.黏粒载体（考斯质粒载体）：是一类人工构建的含有λ-DNAcos 序列和质粒复制子的特殊类型的载体。 11.质粒：是生物细胞内固有的、能独立于寄主染色体而自主复制、并被稳固遗传的一类核酸分子 12.探针：当用一个标记的核酸分子与核酸样品杂交,即可查明该样品中是不是存在与该标记核酸分子具有同源性的核酸分子。那个标记的核酸分子称为探针(probe)，能够是DNA，也能够是RNA，或合成的寡核苷酸. 13、SD 序列：是存在于原核生物起始密码子上游7-12 个核苷酸内的一种4-7 个核苷酸的保守片段，它与16SrRNA3’端反向互补，因此可将mRNA 的AUG 起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。 14、包括体：目的蛋白子啊细胞质的还原性环境中，以不溶性的形式产生并聚集形成蛋白质聚合物即为包括体。 简答： 1. 阻碍限制性核酸内切酶活性的因素 答：1）DNA 的纯度 2）DNA 的甲基化程度 3）消化反映的缓冲液系统 4）DNA 的分子结构 5）酶的纯度 6）酶切反映的温度 7）酶的星号活性 2.大肠杆菌DNA 聚合酶Ⅰ与klenow 片段的比较 答：1）结构上的区别：Klenow 片段是完整DNA 聚...