一、实验目的1、学习并掌握动物细胞培养的无菌操作技术。2、学习并掌握细胞传代培养的方法。3、学习并掌握用倒置荧光显微镜观察细胞细胞形态。二、实验原理细胞培养（ cell culture）：细胞在体外条件下生长，细胞不再形成组织。动物细胞培养（ animal cell culture）就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞（使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶）然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 由于细胞具有生长和自我复制的能力，为细胞体外培养和研究提供可能。动物细胞培养可分为原代培养和传代培养。原代培养（ primary culture）即直接从动物机体分离、获得组织细胞，在无菌条件下， 用胰蛋白酶消化或机械分散等方法，将动物组织分散成单个细胞开始首次培养长出单层细胞的方法。传代培养（ subculture）当细胞生长增值达到一定密度，用胰蛋白酶将细胞消化分散成单细胞，将细胞转移到新的培养皿中扩大培养的方法。高等生物是由多细胞构成的整体， 在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内的功能活动是十分困难的，但如果把或细胞拿到体外培养、 增殖并进行观察和研究， 则方便简单的多。 被培养的动物细胞是非常好的实验对象和实验研究材料，对体外培养的活细胞进行研究可以帮助人类探索防治各种疾病途径和机制，也可以人为地诱导和改变细胞的遗传性状和特性，因此，动物细胞体外培养技术是研究细胞分子机制非常重要的实验手段，被广泛应用于医学、生物技术、基因工程等研究领域。三、细胞培养相关设施及材料1、细胞培养室无菌操作区：只限于细胞培养及其它无菌操作，与外界隔离。孵育区：培养箱设定的条件为37℃， 5%CO2。制备区：培养液及有关培养用液体的制备，液体制备后应该在净化工作台进行过滤除菌。储藏区：包括冰箱、干燥箱、液氮罐等。清洗区和消毒灭菌区：清洗区为相对污染区，消毒灭菌区与清洗区分开。2、细胞培养常用基本设施：荧光显微镜、超净工作台、孵箱、电热鼓风干燥箱、冰箱、液氮罐、消毒器、恒温水浴槽、滤器等。细胞培养常用器皿： 培养瓶、 培养板、 培养皿，玻璃瓶、 吸管，离心管、冻存管，注射器，烧杯、量筒等。3、细胞培养用品的清洗、消毒新玻璃器皿要用 5%稀盐酸浸泡，以中和其表面碱性物质：刷洗：硫酸清洁液浸泡：浓硫酸+重铬酸钾 +蒸馏水；冲洗：流水冲洗 15-20 次，蒸馏水冲洗 3 次，三蒸水漂洗 1-3 次。所有需灭菌的器械、 物品灭菌前均需包装， 防止灭菌后...
