分批培养与补料分批培养的区别
补料分批培养的优点
分批式培养是指先将细胞和培养液一次性装入反应器内进行培养,细胞不断生长,同时产物也不断形成,经过一段时间的培养后,终止培养
在细胞分批培养过程中,不向培养系统补加营养物质,而只向培养基中通入氧,能够控制的参数只有pH值、温度和通气量
因此细胞所处的生长环境随着营养物质的消耗和产物、副产物的积累时刻都在发生变化,不能使细胞自始至终处于最优的条件下,因而分批培养并不是一种理想的培养方式
分批培养过程特征如图14-2
图14-2动物细胞分批式培养过程的特征细胞分批式培养的生长曲线与微生物细胞的生长曲线基本相同
在分批式培养过程中,可分为延滞期、对数生长期、减速期、平稳期和衰退期等五个阶段
分批培养过程中的延滞期是指细胞接种后到细胞分裂繁殖所需的时间,延滞期的长短根据环境条件的不同而不同,并受原代细胞本身的条件影响
一般认为,细胞延滞期是细胞分裂繁殖前的准备时期,一方面,在此时期内细胞不断适应新的环境条件,另一方面又不断积累细胞分裂繁殖所必需的一些活性物质,并使之达到一定的浓度
因此,一般选用生长比较旺盛的处于对数生长期的细胞作为种子细胞,以缩短延滞期
细胞经过延滞期后便开始迅速繁殖,进入对数生长期,在此时期细胞随时间呈指数函数形式增长,细胞的比生长速率为一定值,根据定义式中t:培养时间(h);X0:细胞的初始浓度;X:t时刻的细胞浓度;μ:细胞的比生长速率
细胞通过对数生长期迅速生长繁殖后,由于营养物质的不断消耗、抑制物等的积累、细胞生长空间的减少等原因导致生长环境条件不断变化,细胞经过减速期后逐渐进入平稳期,此时,细胞的生长、代谢速度减慢,细胞数量基本维持不变
在经过平稳期之后,由于生长环境的恶化,有时也有可能由于细胞遗传特性的改变,细胞逐渐进入衰退期而不断死亡,或由于细胞内某些酶的作用而使细胞发生自溶现象
图14-3典型的分批