沉淀反应基本概念•沉淀反应可溶性抗原与相应抗体在适当条件下反应生成沉淀物•特点–反应物可溶(溶液)–生成物为沉淀(抗原抗体均为多价,相互结合,形成空间网格,体积变大而从溶液中析出)–抗原抗体的比例对试验现象的影响明显•类型反应场所检测方法液相沉淀试验凝胶扩散试验凝胶免疫电泳试验液相内沉淀试验•环状沉淀试验–原理将抗原液叠加在已知的抗体溶液上面,在两液的交界面抗原抗体发生反应生成白色沉淀环抗体抗原沉淀环–方法评价简便快速、但只能定性且灵敏度低,少用•絮状沉淀试验–原理抗原溶液与抗体溶液混合,在电解质存在的条件下,两者结合出现肉眼可见的絮状沉淀–方法评价方法简单,不需特殊设备,灵敏度低,受抗原抗体比例影响明显,少用;可用于确定对应抗原抗体反应的最适比•免疫浊度测定–一定比例的抗原抗体反应可生成肉眼不可见的、一定大小的复合物–光束通过该溶液时,免疫复合物对光会产生作用(吸收、折射),作用的大小与复合物的多少呈正相关–根据测量手段和方法的不同可分为:透射比浊法、终点散射比浊法和速率散射比浊法透射比浊法•原理–在固定且过量的抗体中加入待测的抗原,经过一段时间反应后生成复合物,复合物的量与待测抗原含量成正比–当光束通过该溶液时,被复合物吸收、反射,导致透射光的减少,减少的程度与复合物的量成正比–以已知抗原的浓度为横坐标,对应的吸光度为纵坐标,建立标准曲线,通过测定待测抗原反应后溶液的吸光度大小,在曲线上测出待测抗原的浓度•方法评价–灵敏度较高、重复性较好、操作简便、对仪器要求不高–反应时间长、参加反应的抗原抗体比例要保证抗体过剩且不能极度过剩终点散射比浊法•原理–为改良的透射比浊法(测定散射光强度)•方法评价–方法灵敏、可自动化–反应时间适当、影响因素较多、需特殊仪器速率散射比浊法•原理–在过量的抗体中加入待测的抗原,两者反应生成免疫复合物,在反应达终点之前,复合物数量递增–在不同的时