OPCML对卵巢癌细胞抑制的体内外实验研究VIP专享VIP免费

下载后可任意编辑OPCML 对卵巢癌细胞抑制的体内外实验讨论【摘要】 目的 探讨 OPCML 在体外、体内对卵巢癌细胞的影响。方法 将 OPCML用重组慢病毒转导入人卵巢癌细胞A2780、OCC1 和正常小鼠卵巢上皮细胞CD1。通过细胞增殖试验、细胞聚合力试验、细胞周期的分析和体内成瘤试验等来讨论OPCML 在卵巢癌细胞中的功能。结果 OPCML能被重组慢病毒高效地转导入靶细胞，转导效率几乎达 100%，同时达到稳定的表达，Western blot 能检测到 OPCML(60kDa)和下载后可任意编辑GFP(27kDa)基因蛋白在靶细胞中的表达；在 A2780 细胞系，转导入 OPCML 后的细胞的增殖明显的比未转基因或仅转空载体者慢，但在 OCC1 和 CD1 细胞系，OPCML 对细胞的增殖无明显的影响；用流式细胞仪法对细胞周期分析显示，OPCML 对 A2780 的细胞周期有明显的滞留作用，但对 OCC1、CD1 细胞则无明显滞留作用；细胞聚合力试验提示 OPCML 能明显增强细胞的粘附力；表达OPCML 的 A2780 细胞在裸鼠皮下仅有一个有肿瘤生长，体积显着小于 A2780 及 A2780-下载后可任意编辑pWPI 组，免疫组织化学染色法能够检测到OPCML 蛋白在肿瘤组织中的表达。结论 慢病毒载体作为转基因的工具，具有高效转导率和稳定表达的特点；OPCML 能够增加细胞的粘附能力，抑制 A2780 的增殖和体内成瘤，提示 OPCML 可能是一个新的抑癌基因。【关键词】 OPCML；卵巢癌；慢病毒载体；基因转移；移植瘤模型 Key words：OPCML; Ovarian cancer; Lentiviral vector; Gene transfer; 下载后可任意编辑Xenograft model 0 引言 OPCML (Opioid binding protein/cell adhesion molecule like )定位于人染色体11q25，而已有的讨论证实在这个区域的杂合子缺失与卵巢上皮癌的不良预后相关。因而提示在这个区域可能存卵巢癌的抑癌基因。OPCML 与肿瘤的关系目前尚不清楚。我们已经从正常组织中克隆 OPCML 全长基因，并克隆到了慢病毒载体，为了进一步明确 OPCML 的功能，本讨论利用重组慢病下载后可任意编辑毒将 OPCML 转导入卵巢癌细胞，讨论转基因前后细胞生物学特性的变化。 1 材料和方法 材料 细胞及质粒来源 人胚胎肾上皮细胞 293T、人卵巢浆液性囊腺癌细胞系 A2780、人卵巢透明细胞癌细胞系 OCC1 和小白鼠正常卵巢上皮细胞系CD1 均为渥太华大学癌症中心保存和提供，293T、A2780 和 OCC1 均不表达 OPCML。质粒pWPI GFP、和 pMDG ...