Agilent_1260_HPLC_工作原理及简单操作VIP专享VIP免费

Agilent1260HPLC工作原理及简单操作Agilent1260HPLC工作原理及简单操作•培训目的：1.了解HPLC各模块的原理；2.掌握HPLC各模块日常维护的要点；3.掌握开机，关机。Agilent1260HPLC工作原理及简单操作•内容：一、HPLC各模块的原理及维护；二、开机/关机操作；三、讨论；四、评估。一、HPLC各模块工作原理及维护HPLC：高效液相色谱仪（HighPerformancesLiquidChromatography）。由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几个部分组成。工作时储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经样品进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。溶剂柜泵自动进样器柱温箱FLD检测器DAD检测器馏分收集器关于溶剂HPLC各模块的工作原理及维护•所有溶剂应为HPLC级，水应为二次超纯水；•所有溶剂应经过过滤。过滤水应使用水相滤膜，过滤有机相应使用有机相滤膜，不能混用。每一次滤膜只能用一次，不能重复使用；•如果没有在线脱气机，所有溶剂应经过超声脱气；•水易滋生藻类，避免直接照射，过滤水最好使用不要超过两天；•如果条件允许可向溶剂中加入0.001-0.0001M的叠氮化钠；•注意溶剂的相容性，避免使用不相容的溶剂；•避免使用强酸、强碱或有机氯等腐蚀性溶剂；•在溶剂瓶中的溶剂过滤头可能会堵塞，必要时小心拿下用强酸（35%硝酸）浸泡时，用水冲洗，但不要使用超声处理。在线真空脱气机•在线真空脱气机的管路容量为12ml，压力范围为110Torr-190Torr。•为保证脱气机的良好使用性能，在下述情况下需要用注射器抽洗脱气机管路，每个通道使用不低于30ml的异丙醇。1，新的脱气机或新的管路；2，更换了溶剂，尤其是缓冲盐与有机相之间、两个不相容流动相之间的互换时；3，输液泵关闭了一段时间，或使用挥发性溶剂混合物。HPLC各模块的工作原理及维护关于泵：（四元泵）HPLC各模块的工作原理及维护四元泵工作原理图：在常压下将两种（或多元溶剂）输至混合器中混合，然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。因溶剂混合在低压下进行，故称低压混合系统。样品进入系统放空阀阻尼器单向阀主动阀在线真空脱气机高速比例电磁阀ABCD关于泵（泵头组件）出口球阀BOV出口球阀BOV清洗阀PurgeValve清洗阀PurgeValve柱塞杆Piston柱塞杆Piston主动输入阀AV主动输入阀AVHPLC各模块的工作原理及维护活塞外框架活塞外框架SealWash组件SealWash组件泵头密封垫泵头密封垫泵腔泵腔更换过滤白头•在清洗阀中的过滤白头需要更换，在清洗状态下，设置流量为5ml/min，此时系统压力如果超过10bar，则需更换过滤白头。•更换步骤：1，关闭泵电源；2，用扳手去掉通往进样器上的毛细管，拔掉废液管；3，用专用扳手小心把清洗阀卸下来；4，轻轻去掉聚四氟乙烯密封垫和金密封垫，将过滤白头拿出；5，更换新的过滤白头，装上聚四氟乙烯密封垫和金密封垫；6，装上清洗阀；7，连接管路。过滤白头过滤白头聚四氟乙烯密封垫聚四氟乙烯密封垫金密封垫金密封垫清洗阀PurgeValve清洗阀PurgeValveHPLC各模块的工作原理及维护更换过滤白头1，去掉毛细管，废液管1，去掉毛细管，废液管2，卸掉清洗阀2，卸掉清洗阀3，更换过滤白头3，更换过滤白头4，更换白头，装好清洗阀4，更换白头，装好清洗阀HPLC各模块的工作原理及维护泵的注意事项1，溶剂的过滤、脱气；2，避免使用腐蚀性溶剂；3，在满足分析的前提下，尽可能使用较低的流速—较低的系统压力。4，更换过滤白头；5，考虑溶剂的相容性；6，尽可能使用新鲜的水；7，使用0.01M以上浓度的缓冲溶液要选配柱塞清洗组件，清洗液不能干涸。8，使用正相溶剂比如环己烷时，建议使用聚乙烯密封垫，部件号为0905-1420，在0—200Bar下使用聚乙烯密封垫比标准密封垫更耐磨损。•四元泵：四元泵多通道比例阀MCGV使用时注意，缓冲溶液要放在A、D通道，以避免盐颗粒析出。建议A通道：水；B、C通道：有机溶剂；...