细胞培养污染的途径、危害及防止方法 污染是细胞培养技术中面临的重要问题。由于每一种细胞有其独特的培养体系，因此污染造成的后果也不尽相似。某些污染的发生往往难以察觉和检测，并且污染源能长久共存于培养体系中，这类污染事实上大部分被人们无视了。培养的细胞作为一种生物体，会对培养环境以及环境中的污染物作出对应的反映，造成培养细胞生物学特性的变化，而对实验成果造成潜在的威胁，并且随着污染时间的延长而增加。 培养环境中的物理、化学及生物因素都可能侵入培养环境造成污染。由于入侵的微生物在培养体系中不停增殖、代谢，因此生物性的污染对细胞的危害最大。随着污染微生物的不停增殖，交叉污染的可能性也不停增加。另外，微生物代谢消耗大量必需的养分，同时产生多个有毒的代谢产物，如酶、抗原及毒素等，进一步对细胞产生毒害作用。因此，认识细胞培养污染的途径及其危害性，建立细胞培养规范的操作办法及规章制度，能够有效地避免污染，确保明验体系的稳定性和可靠性。 1 细胞培养基本技术 为了减少污染对细胞培养的影响，必须建立细胞冻存库。细胞冻存库应当分主细胞库（Master cell bank，MCB）和工作细胞库（Working cell bank，WCB），当需要做实验时从主细胞库中复苏细胞建立工作细胞库。每一种冻存标本都应明确统计细胞的性质、代数及有无污染。同时还应建立规范的检测程序进行菌检及细胞鉴定［1］。 为了确保培养细胞系的完整性，必须进行具体的实验统计，应涉及下列内容：细胞系的种类及来源、有无污染（如细菌，病毒，支原体）、细胞代数和倍增时间、以及选择性突变。具体的统计有助于对细胞的遗传及生理特性在常规传代培养中因突变、污染及多个因素造成的变化进行分析。通过持续传代培养的细胞与它较早代数的冻存细胞相比，随着培养时间的延长，细胞在适应环境的过程中，其生物特性已发生了变化。培养的细胞由若干生长速度及活力各异的亚群构成。随着培养时间的延长，生长速度快及活力高的细胞亚群逐步占优势，这种选择性趋势会影响整个细胞群的生物特性。应用不同代数的细胞持续进行实验则成果会发生偏差。建立细胞冻存库就能避免这种影响，通过复苏相似代数的细胞，人们就能在较为均一的条件下重复实验。 细胞培养工作需要清洁，保持良好的环境及规范的操作程序［2，3］。超净工作台是细胞培养中普遍使用的无菌操作装置，它需要合理的布置及经常性的维护。超净工作台的工作原理是驱动经高效滤菌净化后...
