2002年12月30日,两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行,植物细胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体,动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,两批新人同时在“产房”—电融合仪内孕育新生命。“太空婚礼”这两场“太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技这两场“太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技术术植物体细胞杂交技术动物细胞融合技术(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物体细胞杂交过程示意图一、动物细胞融合细胞融合是正常的生命活动。两个细胞正在融合受精作用1、定义:两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。也称细胞杂交一、动物细胞融合一、动物细胞融合一、动物细胞融合一、动物细胞融合杂交细胞:融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞成为杂交细胞。细胞膜的流动性灭活病毒、PEG、电激等融合后的细胞进行有丝分裂,形成完整的杂交细胞诱导的手段?融合后细胞的类型?AB杂种细胞遗传物质有什么特点?三种AA、AB、BB(A、B)含两种生物的遗传物质1.2动物细胞融合过程原理?2、诱导融合的因素•生物法:灭活的病毒诱导融合.(病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。)•化学法:聚乙二醇PEG诱导融合.•物理法:电激融合病毒颗粒黏附细胞表面细胞膜连接细胞膜被病毒颗粒穿通细胞融合、形成杂种细胞不能,因为不灭活的病毒会感染细胞。((三三))动物细胞融合的应用1.突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。(至今种间、属间、科间,甚至动物与植物之间的细胞融合已获得成功。)2.成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。3.为制造单克隆抗体开辟了新途径。鼠—鸡、鼠—兔、鼠—猴、人—鼠、人—兔、人—鸡、人—蛙、酵母菌—鸡、人—胡萝卜等抗体的传统生产方法抗原反复注射动物从动物的血清中分离抗体该法制备抗体的缺点:产量低、纯度低,且抗体的特异性差、灵敏度低。单克隆抗体!单克隆抗体!读下面一段资料,找出单克隆抗体的概念人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体,必须用单个B细胞进行无性繁殖,即克隆。2.1单克隆抗体的概念•单克隆抗体:单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体提示1:对B细胞进行细胞培养可行吗?提示2:我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的?问题:如何大量生产单克隆抗体?请尝试设计一个方案。2.2单克隆抗体的制备一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞动物细胞培养技术设计方案:动物细胞融合技术单克隆抗体既能产生特异性抗体,又能大量增殖的细胞19751975年英国科学家年英国科学家米尔斯坦米尔斯坦和和柯勒柯勒的实验的实验①为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白?②会有几种融合方式?③杂交瘤细胞是如何筛选出来的?有何特点?④是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体?⑤如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体?BB、B瘤、瘤瘤(B、瘤)(一选)选择性培养基:只有杂交瘤细胞才能存活获得产生相应抗体的B细胞(二选):选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞√体外培养体外培养小鼠腹腔内培养小鼠腹腔内培养杂交瘤细胞特点:杂交瘤细胞特点:既能产生特异性既能产生特异性抗体,又能大量抗体,又能大量增殖。增殖。•1、作为诊断试剂:在临床生化诊断、病理组织定位、体内肿瘤的定位等,与常规抗体相比,具有准确、高效、简易、快速特点.•2、用于治疗疾病和运载药物:•主要用于癌症治疗。•生物导弹:•单克隆抗体:导向。准确找到癌细胞位置,原位杀死癌细胞。22、单克隆抗体的优点:、单克隆抗体的优点:特异性强,灵敏度高,可大量制备。3、单克隆抗体的应用3、单克隆抗体的应用2.3单克隆抗体的应用诊断试剂——最广泛应用准确、高效、简易、快速单克隆抗体最主要的优点:特异性强,灵敏度高,并能大量制备。单克隆抗体与单克隆抗体与早孕测试早孕测试•试剂主要成分:抗人...