细 胞 生 物 学 实 验 测 试 题 1、 试 述 荧 光 显 微 镜 的 原 理 和 用 途 。（ 并 操 作 ） 原 理 ： 荧 光 显 微 镜 是 以 紫 外 线 为 光 源 ， 用 以 照 射 被 检 物 体 ， 使 之 发出 荧 光 ， 然 后 在 显 微 镜 下 观 察 物 体 的 形 状 及 其 所 在 位 置 。 （ 滤 光 镜 片 ： 获 得 所 需 波 长 的 激 发 光 ； 光 源 ： 高 压 汞 灯 ） 用 途 ： 荧 光 显 微 镜 用 于 研 究 细 胞 内 物 质 的 吸 收 、 运 输 、 化 学 物 质 的 分布 及 定 位 等 。 细 胞 中 有 些 物 质 ， 如 叶 绿 素 等 ， 受 紫 外 线 照 射 后 可 发 荧 光 ；另 有 一 些 物 质 本 身 虽 不 能 发 荧 光 ， 但 如 果 用 荧 光 染 料 或 荧 光 抗 体 染 色 后 ，经 紫 外 线 照 射 亦 可 发 荧 光 ，荧 光 显 微 镜 就 是 对 这 类 物 质 进 行 定 性 和 定 量 研究 的 工 具 之 一 。 2、 试 述 酸 性 磷 酸 酶 显 示 法 的 原 理 及 主 要步骤。 原 理 ： 酸 性 磷 酸 酶 （ ACP） 是 溶酶 体 的 标志酶 ， 通常酸 性 磷 酸 酶 在 pH为 5 左右时发 挥作 用 能 水解磷 酸 酯而释放出 磷 酸 基， PO43-与底物 中 硝酸铅反应生 成磷 酸 铅沉淀物 。 由于 这 些 沉淀物 是 无色 的 ， 需 再与黄色 的 硫化铵反应， 生 成棕黄色 到棕黑色 的 硫化 铅沉淀而被 显 示 出 来。 其 反应过程如下 ： β-甘油磷 酸 钠+酸 性 磷 酸 酶 →甘油+PO43- PO43-+Pb(NO3)2 →Pb3(PO4)2↓ Pb3(PO4)2+(NH4)2S →PbS↓(棕黑色 ) 主 要步骤： 1、 前处理 ： 获 取小白鼠或 大白兔腹腔液（ 猪肝） 2、 制片 ： （ 1）、 将腹腔液（ 肝细 胞 悬液） 滴一 滴于 冰冻的 干净载玻片 上， 用 牙签涂开， 自然 干燥。 （ 2）、 放入10%中 性 福尔马林固定 液中 固定30min。 （ 3）、 蒸馏水中 漂洗,3-5 次。 （ 洗去固定 液） （ 4）、 磷 酸 酶 作 用 液， 37°C， 30Min。 （ 5）、 蒸馏水中 漂洗3 次， 5min 一 次。（ 洗去游离铅离子） （ 6）、 1%硫化 铵处理...
