第一局部防腐挑战实验调研结果1 实验样品样本要求新鲜,没有被微生物污染,一般每个样本为 300g.2 微生物挑战性实验2.1 实验菌株不同国家、组织、企业对挑战实验选择的测试菌种有一定差异〔如表 1〕,国内参照美 国化装品、香精和洗涤剂协会〔CTFA〕推荐的菌种〔因其较具代表性,如表 2 所示〕,所以 更为恰当.〔注意菌株来源问题：同属一个种的细菌来源不同,菌株不同,MIC 值不同〕表 1 某些国家、组织、企业用于化装品微生物挑战试验的测试菌株菌株美国〔药典〕美国〔ISP 公司〕英国〔药典〕德国〔Henkel 公司〕德国〔S&M 公司〕白假丝酵母VVVVV黑曲霉VVVVV红色青霉V绿色木霉V绳状青霉V大肠埃希氏菌VVVV镉绿假单胞菌VVVV金黄色葡萄球菌VVVVV粪肠球菌V产气肠杆菌V表皮葡萄球菌V日勾维肠杆菌V洋葱假单胞菌VV肺炎克雷伯氏菌V恶臭假单胞菌V荧光假单胞菌V表 2CTFA 化装品微生物挑战试验的菌株选择种类菌株数量金黄色葡萄球菌革兰氏阳性菌表皮葡萄球菌至少选一种肺炎克雷伯氏菌阴沟肠杆菌发酵革兰氏阴性杆菌大肠埃希氏菌至少选两种变形菌属日勾维肠杆菌铜绿假单胞菌洋葱假单胞菌荧光假单胞菌非发酵革兰氏阴性杆菌恶臭假单胞菌至少选一种黄杆菌属不动杆菌属白假丝酵母酵母近平滑假丝酵母至少选一种黑曲霉霉菌黄绿青霉至少选一种产芽抱菌枯草芽胞杆菌供选用生产现场别离菌适当菌株一种以上2.2 培养基牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂培养基2.3 试验用菌液的配置(1)标准悬液的配制1%硫酸 9.9ml 与 1%氯化钡 0.1ml,混合后配制成的悬液浓度为 3 X 108cfu/ml, 此悬液再做 3 倍稀释.(2)细菌菌悬液的配制实验前将菌株接种到各个培养基斜面上,36 摄氏度恒温培养 48 小时.将已 培养好的活性菌种,用灭菌生理盐水清洗到灭菌锥形瓶中,充分振荡摇匀.用移 液枪从锥形瓶中吸取菌液作稀释,浊度和标准悬液的浊度(3X108cfu/ml)相同 为止；此时的稀释菌液再做 3 倍稀释,即为所需的 1X108cfu/ml 的菌悬液,做细菌 总数确定细菌数.(3)霉菌菌悬液的配制将已培养好的活性菌种,用灭菌的生理盐水清洗到灭菌锥形瓶中,充分振荡 摇匀；用移液枪从锥形瓶中吸取菌液作依次的 10 倍稀释,每次的稀释用血球计 数板计数,必须 5 个中格的霉菌总数在 190〜210,落在此范围内的菌悬液为我 们所需的 1X108cfu/ml 的霉菌菌悬液,做霉菌总数确定霉菌数.2.4 接种2.4.1 接种方式1.1单菌接种：每种测试菌株单独做一个挑战试验.这种方法的优点是容 易了解每种微...
