河北工程大学---医学院我们毕业啦其实是答辩的标题地方免疫共沉淀技术的应用与研究一班六组免疫共沉淀技术介绍免疫共沉淀技术的步骤免疫共沉淀技术的优劣免疫共沉淀技术的应用SYLLABUS免疫共沉淀技术介绍免疫沉淀原理图：1、样品准备2、样品预清洗3、抗原/抗体孵育4、沉淀反应5、电泳分析技术介绍步骤优劣应用技术介绍步骤优劣应用免疫共沉淀定义免疫共沉淀（CO-IP）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用语研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整的细胞内生理性相互作用的有效方法.“”技术介绍步骤优劣应用免疫共沉淀原理当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。免疫共沉淀技术步骤技术介绍步骤优劣应用细胞裂解液中加入抗体，与抗原形成特异免疫复合物，经过洗脱，收集免疫复合物，然后进行SDS聚丙烯凝胶电泳及免疫印记法分析。细胞裂解物或蛋白混合物和偶联有抗体的胶一起孵育离心并洗涤洗脱偶联的抗体抗原可与抗原反应的蛋白分析免疫共沉淀优劣（1）可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质－蛋白质相互作用；（2）两种蛋白质的结合可能不是直接结合，而可能有第三者在中间起桥梁作用；（3）必须在实验前预测目的蛋白是什么，以选择最后检测的抗体，所以，若预测不正确，实验就得不到结果，方法本身具有冒险性。（4）灵敏度没有亲和色谱高。缺点（1）相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的，处于天然状态；（2）蛋白的相互作用是在自然状态下进行的，可以避免人为的影响；（3）可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。.优点步骤优劣应用技术介绍免疫共沉淀应用步骤优劣应用技术介绍(一)验证蛋白复合物的存在蛋白质在生物体内发挥作用是通过和其他蛋白质相互作用来实现的,因此蛋白复合物的研究成为近期研究的热点。(二)发现新的蛋白复合物p53基因是一种重要的抑癌基因,而在鼻咽癌中过表达后功能失常,发挥抑癌作用,因此以P53蛋白为诱饵,采用免疫共沉淀技术分离出了9个与P53相结合的蛋白,并用蛋白印迹验证了这9个蛋白,既有我们熟知的能与P53相结合的蛋白,又有一些新发现的蛋白，这为揭示鼻咽癌的发病机制奠定了基础。(三)在中医药研究中的应用Co—IP检测的是体内实际存在的复合物,能揭示生理条件下蛋白之间的相互作用,发现蛋白之间的未知作用,能够从整体上来研究中医理论。THANKS
