动物细胞培养常用技术.txt和英俊的男人握握手,和深刻的男人谈谈心,和成功的男人多交流,和普通的男人过日子。动物细胞培养常用技术 动物细胞培养 中山大学实验动物中心 前 言 1885年Roux最早尝试使组织离体培养,材料是鸡胚神经板,采用生理盐水为培养液,并首次采用组织培养这个术语。 1907年Harrison 和1912年Carrel开始把组织培养作为一种方法,用于研究离体动物细胞的培养。 由于组织培养在医学研究中的应用,如抗病毒疫苗的生产等,现已经逐渐发展成为一门精细技术。许多细胞株、细胞系的培育成功,尤其是以人的肿瘤组织为材料建立的各种细胞系,如Hela细胞系(Gey,1952),可用来进行一系列研究,更加促进了组织培养技术的发展。 组织培养中热门的研究领域 1)细胞内部的活动,如DNA的复制和转录、蛋白质合成、能量代谢; 2)细胞内部的流动,如RNA从细胞核向细胞质方向运转,激素受体复合物的易位等; 3)生态学,如营养、感染、病毒或化学诱变、药物作用; 4)细胞与细胞之间的相互作用,如胚胎诱导、细胞群体的动力学等。 组织培养的分类及基本概念 分类: 1.组织培养(Tissue Culture) 指的是从体内取出组织,在模拟体内生理环境,无菌、适当温度和一定营养条件下,使之生存和生长并维持其结构和功能的方法。 2.细胞培养(Cell Culture) 培养物是单个细胞和细胞群。 3.器官培养(Organ Culture) 培养的是器官的原基、器官的一部分或整个器官,使之在体外生存、生长和保持一定功能的方法。 组织培养的细胞生物学特点: 1.体内外细胞的差异:当人工条件和体内实际情况不完全相同时,细胞在体外培养后,一旦失去神经体液调节和细胞间相互影响,生活在缺乏动态平衡的环境中,发生变化则是必然。细胞最多见的表现是:返祖(Atavism)现象,即失去原有组织结构和细胞形态、分化减弱或不显、细胞趋单一化、不死性、恶性状。 2.细胞增殖和分化:是细胞生命进化中所获得的基本属性,增殖使细胞数量增多;分化使机体结构和功能多样化,最后演变成完整的有机体。 培养细胞的分化 细胞分化机制是极其复杂的,是在细胞与细胞、细胞与体液和细胞与细胞外基质相互作用下,众多基因参与、经过多阶段和多环节完成的动态演变过程。 不适应(Deadaption) 细胞在体内时所拥有的分化特性减弱或不显。例如肝细胞在体外丧失了产生酪氨酸转移酶的特性。 脱分化(去分化)(Dedifferentiation) 由于基因变异而使细胞失去分化能力。...