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P450酶代谢与基因检测国家人类基因组北方研究中心中科康爱(北京)生物科技有限公司基因概述P450酶应用基因检测技术基因主要在细胞核里的染色质(体)上核膜染色质核仁细胞核彩色电镜照片染色质是细胞核内最主要的物质它是遗传物质的存在形式,当细胞进行分裂时,染色质经过螺旋、折叠、卷曲形成具有特定形态的染色体,因此,染色质和染色体是同一物质在静止期和分裂期的不同形态表现。染色质与染色体关系图解基因的定义与工作原理人体是由无数细胞组成的每个体细胞的细胞核里有23对染色体每条染色体是由一个DNA分子组成基因是DNA分子上的具有特定遗传功能的片段基因是遗传的基本单位生物的性状是由遗传物质DNA决定的,那么控制性状的遗传信息怎样贮存在DNA分子中呢?用遗传学方法证明:DNA上三个相邻的核苷酸构成一个三联体,决定多肽链上的一个氨基酸。即特定的核苷酸三联体构成了遗传密码.(geneticcode)。DNA上有4种核苷酸,可组成43(64种)不同的三联体密码。所以,生物的遗传信息是以遗传密码的形式贮存在DNA链上的。基因概念基因,也称为遗传因子。是指携带有遗传信息的DNA序列,是控制性状的基本遗传单位。基因通过指导蛋白质的合成来表达自己所携带的遗传信息,从而控制生物个体的性状表现。基因的特点能忠实地复制自己,以保持生物的基本特征;基因能够“突变”,突变绝大多数是与疾病相关的,另外的一小部分是非致病突变。与疾病相关的突变就是我们要检测的内容。药物相关基因突变的检测越来越被人们重视,已应用临床。基因检测与临床的结合:药物相关基因:人体内药物代谢酶和药物作用靶点(转运体和受体)。这些基因的突变会显著改变人体对药物的反应性。这是遗传因素造成药物反应个体差异的内在机制。疾病的诊断:任何单一基因或者是多基因突变对疾病的预测或治疗价值都是有指导意义的。基因概念P450酶应用基因检测技术第二章联合国世界卫生组织统计:全球死亡患者中,1/3是死于不合理用药,而非死于自然疾病本身。我国国家卫生部药品不良反应监察中心的数据为:住院病人中,每年约有20万人死于药品不良反应家庭用药不良反应需要住院治疗的病人则多达250万人个性化用药能够选择最合适的药,用最合适的剂量,做到效果最好、毒副性最小。药物的首过效应:药物口服后,经胃肠道到达肝脏,一部分药物将在代谢酶作用下被代谢。参与药物代谢的主要酶类人肝中Ⅰ相和Ⅱ相代谢酶Ⅰ相酶Ⅱ相酶CYP1A1/2CYP2A6CYP2B6CYP2C9CYP2C19CYP2D6CYP2E1CYP3A4/5NADPH-醌氧化还原酶谷胱甘肽-S-转移酶N-乙酰转移酶UDP-葡糖醛酸转移酶硫转移酶CYPS参与了90%以上的药物代谢。细胞色素P450分布的多样性动物,植物,真菌,细菌中广泛存在。脊椎动物的肝脏是P450含量最丰富的器官。在皮肤、肺、消化道等防御组织及肾、肾上腺皮质和髓质、睾丸、卵巢、主动脉和血小板等部位也被证明存在P450。15CYPs结构不同种属间CYPs的序列差异大,但其三维结构高度保守人类CYP2C9与细菌CYP450BM3晶体结构的重叠图CYP450的发展史1955-Klingenbery1964-Omura,SatoEstabrookCooper1967-Conney,Remmer1969-LU,Coon,Junk1974-Sato,Coon,Lu1982-Fujii-Kuriyamaetal,DiscoveryofCO-bindpigmentat450nminlivermicrosomes.(肝微粒体上存在P450)。CYP450identifiedasahemeprotein(首次命名)CYP450asadrugmetabolizingenzyme(demethylation,hydroxylation)InductionbyPB,3MC(Tolerance)andeffectofage,sex,diet,developmentSolubilization,purification,reconstitutionandpreparationofantibody.MultipleformsofCYP450(separation,purification,substratespecificity,quantitationGenecloning,P450cam,regulation.2000papers/year,转录因子、受体、aa改变、底物特异性和种属差异,人基因多态性P450特征:1、分布P450以可溶性和膜结合两种形态存在于生物体内。在细胞内主要分布在线粒体,微粒体,内质网上。2、结构特征A.它是分子质量在46-60Da的结构类似而又不尽相同,性质类似而又有差异的一族蛋白质。B.来源于不同种,或同种不同品系,或同一品系不同组织的P450,其分子量、光谱特征、分布特点、免疫性质...

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