— 1— —蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测（KJ201710）1范围本方法规定了蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测方法。本方法适用于油菜、菠菜、芹菜、韭菜等蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速测定。酶抑制（率）法（分光光度法）2原理在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率。3试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682 规定的二级水。3.1 试剂3.1.1丙酮（ CH3COCH 3）。3.1.2磷酸氢二钾（ K 2HPO4）。3.1.3磷酸二氢钾（ KH 2PO4）。3.1.45,5-二硫代双（ 2-硝基苯甲酸）（C14H8N2O8S2）。3.1.5碳酸氢钠（ NaHCO 3）。3.1.6碘化乙酰硫代胆碱（ C7H 16INOS ）。3.1.7pH8.0 缓冲溶液： 分别称取 11.9 g 无水磷酸氢二钾及3.2 g 磷酸二氢钾， 溶解于 1000 mL 水中，混匀。3.1.8显色剂：分别取160 mg 5,5-二硫代双（ 2-硝基苯甲酸）（ DTNB ）和 15.6 mg 碳酸氢钠，用20 mL 缓冲溶液溶解，4 ℃冰箱中保存。3.1.9底物：取 125 mg 碘化乙酰硫代胆碱，加15 mL 蒸馏水溶解，摇匀后置于4 ℃冰箱中保存备用。保存期不超过两周。3.1.10乙酰胆碱酯酶：4 ℃冰箱中保存备用。3.2 参考物质— 2— —3种有机磷和 2种氨基甲酸酯类农药参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1，纯度均≥ 98%。表 1 有机磷和氨基甲酸酯类参考物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量序号中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子质量1 克百威Carbofuran 1563-66-2 C12H15NO 3221.25 2 灭多威Methomyl 59669-26-0 C5H 10N 2O2S 162.23 3 丙溴磷profenofos 41198-08-7 C11H15BrClO 3PS 373.63 4 敌敌畏Dichlorvos 62-73-7 C4H7Cl 2O4P 220.98 5 敌百虫Dipterex 52-68-6 C4H 8Cl 3O4P 257.44 3.3 标准溶液的配制3.3.1克百威、灭多威、敌敌畏、敌百虫标准储备液（1000 μ g/mL）：冷藏、避光、干燥条件下保存。3.3.2丙溴磷标准储备液（100 μ g/mL）：冷藏、避光、干燥条件下保存。3.3.3克百威、灭多威、敌敌畏、敌百...
