《《医学实验动物学医学实验动物学》》实验课实验课实验一实验一大、小鼠给药、采血、大、小鼠给药、采血、麻醉和解剖麻醉和解剖实验目的实验目的1.掌握大小鼠常用给药方法和采血技术2.掌握大小鼠的麻醉方法和解剖步骤3.熟悉大小鼠的解剖结构一、小鼠的抓取和固定一、小鼠的抓取和固定注意点注意点抓取小鼠时动作要迅速,要轻防止被小鼠转过头咬,抓其颈后皮肤要多如果被咬,应立即挤出血液,清水冲洗二、大鼠的抓取与固定二、大鼠的抓取与固定三、小鼠灌胃三、小鼠灌胃(给药方法之一)(给药方法之一)将实验小鼠徒手固定灌胃针从嘴角处插入口腔内,紧贴咽后壁插入食道(1ml注射器,深度大约为3cm)推动针管给药(生理盐水)注意不要插入气管,不要抓的太紧以致小鼠窒息死亡最大灌胃量:小鼠最大灌胃量:小鼠1ml;1ml;大鼠:大鼠:8ml!8ml!四、小鼠尾静脉注射(给药方法之二)四、小鼠尾静脉注射(给药方法之二)固定器固定小鼠消毒尾部,扩张血管,左右两侧的静脉将尾巴成一个适宜注射的角度,1ml注射器平行向心方向刺入静脉血管干棉球压迫止血注意排除气泡注射点由尾部远端尾静脉五、小鼠眼底静脉丛采血五、小鼠眼底静脉丛采血一人徒手固定小鼠于桌面上,使眼球充分向外突出将注射器针头从内眼角位置插入眼球和眼眶之间,进针约0.5cm(1ml注射器)另一人慢慢抽动针管采血注意注意::要将小鼠固定好,防止其头部晃动六、大小鼠手术麻醉六、大小鼠手术麻醉腹腔麻醉腹腔麻醉:进针点为右下腹腔,进针角度为与身体成45度,深度约1cm。麻醉剂:麻醉剂:麻醉药为3.5%水合氯醛,剂量按小鼠体重0.1ml/10g,20g的小鼠为0.2ml。七、大、小鼠心脏采血七、大、小鼠心脏采血右下腹腔麻醉(麻醉药为3.5%水合氯醛,剂量按0.1ml/10g)待其麻醉后,仰卧位固定在解剖板上胸骨左侧,腋窝平行线下2-3肋骨间,小鼠心搏动最强处斜行刺入(1ml注射器)缓慢抽动针管采血取血量多时采用(同样适用于大鼠)安全采血量:小鼠安全采血量:小鼠1ml;1ml;大鼠:大鼠:8ml!8ml!大鼠心脏采血八、大体解剖观察及绘图八、大体解剖观察及绘图11..按按0.1ml/10g0.1ml/10g体重,将体重,将SDSD大鼠用大鼠用3.5%3.5%水合氯醛水合氯醛腹腔注射麻醉。腹腔注射麻醉。2.2.腹部朝上固定于解剖板。腹部朝上固定于解剖板。3.3.用用10cm10cm剪刀从下腹部向上剪开皮肤,剪刀从下腹部向上剪开皮肤,打开腹腔,观察腹腔内脏器,观察大鼠肝打开腹腔,观察腹腔内脏器,观察大鼠肝脏时特别注意大鼠无胆囊。脏时特别注意大鼠无胆囊。4.4.用用14cm14cm剪刀打开胸腔,观察胸腔脏器。剪刀打开胸腔,观察胸腔脏器。5.5.根据大体解剖所见,绘图。根据大体解剖所见,绘图。解剖观察操作项目操作项目小鼠小鼠:灌胃、尾静脉注射、眼底静脉丛采血;心脏采血*、麻醉后解剖观察*。大鼠大鼠:灌胃*、腹腔注射麻醉、心脏采血、麻醉后解剖观察。《《医学实验动物学医学实验动物学》》实验课实验课实验二实验二1.1.模拟肿瘤(组织块)移植模拟肿瘤(组织块)移植2.2.裸鼠与正常小鼠免疫器官的比裸鼠与正常小鼠免疫器官的比较较一、实验目的一、实验目的1.了解裸小鼠和KM小鼠的胸腔结构了解正常的胸腺结构与不增殖胸腺基的形态2.掌握正确的胸腺摘除方式3.掌握组织块(肿瘤)皮下移植的基本技术二、实验原理二、实验原理•哺乳动物的胸腺是T淋巴细胞分化成熟的场所,而T淋巴细胞是参与宿主对异体的组织或细胞排斥的主要成分,裸鼠胸腺的原基从第三咽囊起不能发育,因此,裸鼠囊状很小的胸腺残基保持终身。•胸腺的不增殖导致成熟的T淋巴细胞数大量减少,其结果是裸鼠机体不能排斥同种异体和异种间的组织器官移植。•人类的肿瘤能在裸鼠的体内生长,使裸鼠作为一种疾病模型的载体,广泛地运用于研究人类移植性肿瘤生长和转移。三、影响被移植的动物组织或细胞成三、影响被移植的动物组织或细胞成活的因素活的因素•组织的相容性•宿主对移植物的血供•供体组织或细胞的活性•其他因素四、模拟移植物的选择四、模拟移植物的选择肾脏组织——是哺乳动物中血供较好、活力较强的组织五、实验步骤...