流式中参数的意义VIP专享

流式中参数的意义 前向角散射，即FSC 与细胞直径平方正相关（大小），所以我们平时上机的时候，有时用FSC 做阈值，排除碎片及其它颗粒，避免干扰。 侧向角散射，即SSC 是指与激光束正交90 度方向的散射信号，它对细胞膜、胞质、核膜的折射率更敏感，可以提供细胞内结构及颗粒性质的信息 FL2-A ，FL2-W 中A 和W 的含义 FL2-H1024，FL2-H256 中H 的含义，1024 和256 又代表什么呢。 名词“道数”是怎么定义的？ w 好像代表脉冲宽度，但是脉冲宽度反映的是细胞什么特性呢？ H-脉冲高度反映细胞什么特性呢？ 好像你做的是细胞周期分析， 如果是，FL2－A 代表的是荧光峰面积，反映了细胞DNA 含量（前提是用Rnase 处理去掉了 RNA）； FL2－W 代表的是荧光峰宽度，这个值可以区分单个细胞和双联体细胞； 下面的1024 和256 是定义数据文件大小的（记得培训时工程师这么说的） －H 好像没有什么特殊含义 ，就是指这个通道了， 一般检测那个通道的荧光就是选择哪个－H，比如 FSC－H，SSC－H，FL1－H 等等 流式涉及的调节参数太多了，主要的有： 1.电压 2.阈值 3.荧光补偿 4.通道选择：需要哪些通道、选择面积/高度/宽度、线性/Log 5.停止条件选择 太多太多了 FL2-A 代表FL2 AREA，FL2-H 即FL2 HEIGHT，通过这两个参数，可以将粘连体排除出去，因为粘连体跟多倍体有相同的FL2-A，但是FL2-H 远远大于正常细胞。 正确的设置是将 FL2-A 设置在 200 附近。当然，不设在 200 也可以，但是那样会对日后的分析造成困难。200 道是对周期分析最佳的参数。 FSC 是前向角散射，一般代表细胞的体积，值越大代表细胞越大。 SSC 是侧向角散射，一般代表细胞的颗粒度，值越大代表细胞的颗粒度越大，颗粒度指细胞表面的皱折度，细胞内亚细胞器、颗粒的数目等。 我初接触流式，很多东西都不是很清楚，查了园子里的资料也是一知半解的： 1.流式中FL1，FL2，FL3，FL4 分别是指的什么？ 2.PI 单染观察细胞周期可以选其中的哪些呢？为什么？ 3.如果 FL 选用不恰当，对结果会有影响吗？表现在那些方面呢？ 我回答第一和第三个问题： 一，FL1，FL2，FL3，FL4 指的是第 1，第 2，第 3，第 4 个荧光，FL 是 fluorescence 荧光的意思 三，对于流式检测最初的一步就是选择何种方法，通常是何种荧光物 质标记的抗体。厂家根据需要开发了各种荧光标记的抗体，进行选择时首先要满足的就是所选择的抗体必...