EB病毒的生物学特性及感染后的实验室诊断、相关性疾病儿科急诊:陈锡龙1964年Epstein和Barr首次在Burkitt(BL)淋巴瘤体外培养细胞株分离出疱疹样病毒,故命名为EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)属于疱疹病毒科γ亚科中唯一能引起人类感染的淋巴滤泡病毒EB病毒具有嗜B淋巴细胞特性,能够在B淋巴细胞中建立起隐性感染,刺激细胞增生和转化1968年,发现是传染性单核细胞增多症病因1970年发现鼻咽癌组织中存在有EB病毒DNA概述生物学性质题内容ADDDIRECTORYONETITLES01实验室诊断题内容ADDDIRECTORYONETITLES02相关性疾病的诊断ADDDIRECTORYONETITLES03添加标题内容ADDDIRECTORYONETITLES目录EB病毒分子生物学特征•EB病毒属于一种双链DNA病毒,两种形式:线状DNA(可整合于宿主DNA)与环状DNA(游离体)•形态:呈球形,直径:150~180nm,最外层为脂蛋白包膜,包膜内是对称的20面体核衣壳,由162个管状粒组成,核衣壳内有直径为45nm的致密体,内含病毒基因组•基因结构:由DNA顺序长区段(UL)构成(可分为5段),其中掺杂一短区段(US)的重复,两端有末端重复序列(TR)基因组为172000bp,编码五种病毒蛋白:壳抗原(Viralcapsidantigen,VCA)膜抗原(Membraneantigen,MA)早期抗原(earlyantigen,EA)核抗原(nuclearantigen,NA)补体结合抗原(即可溶抗原S)病毒相关核抗原(EBVassociatednuclearantigen,EBNA):EB病毒抗原流行病学史•EBV感染世界各地均有发生•传染源:隐性感染者和患者•传播途径:通过口咽分泌物经密切接触传染•易感染人群:普遍易感,90%的成人在儿童时期曾有无症状感染•根据血清学调查,我国3~5岁儿童的EBVVCA-IgG抗体阳性率达90%以上EB病毒通过包膜糖蛋白结合B细胞的病毒受体部分感染后的B细胞被裂解部分B细胞被T细胞或NK-T细胞杀灭部分B细胞持续感染EB病毒EB病毒感染•易感细胞:B细胞•部位:呼吸道粘膜•感染途径:病毒外膜糖蛋白gp350/220与CD21结合(补体分子C3d受体),通过受体介导的细胞内吞作用进入被感染细胞EB病毒感染形式EB病毒感染AABBD隐性感染溶细胞性感染转化细胞转化细胞C缺陷性感染缺陷性感染隐性感染•0型隐性感染:在健康的EBV既往感染个体,EBV在记忆性B细胞潜伏,只表达EBERs,这些个体称为健康携带者。细胞中含有EBNA1、LMP2以及EBER1RNA。•I型隐性感染:除EBERs外,EBV只表达EBNA1和BamHIA右侧片段(BARTs),如Burkitt’s淋巴瘤;•II型隐性感染:涉及鼻咽癌和何杰金氏病(HD),病毒产物有EBNA1、LMP1、LMP2、EBER和BamHIA片段的转录产物等•III型隐性感染:见于免疫抑制患者的浆细胞淋巴瘤细胞,病毒隐性感染期的6种EBNA、3种LMP和两种EBER均可以被检测到11EBV感染的实验室诊断•EBV特异性抗体检测•嗜异凝集抗体检测•EBV核酸载量检测•EBERs原位杂交试验原发性EBV感染过程中首先产生针对衣壳抗原(capsidantigen,CA)的IgM和IgG在急性感染的晚期,抗早期抗原(earlyantigen,EA)抗体出现在恢复期晚期,抗核抗原(nuclearantigen,NA)抗体产生抗CA-IgG和抗NA-IgG可持续终EBV原发感染和既往感染后抗体滴度变化14抗体的临床意义•VCA-IgM抗体在感染早期出现,可持续数周到3个月•VCA-IgG在病程进入恢复期后滴度下降,以低水平维持终身•VCA-IgA在急性期以及有病毒点力时出现,阳性率低于IgM•EA是病毒增殖的标志,EA抗体在原发感染恢复期和潜伏感染再活化期出现,其出现略迟于VCA-IgM,持续数月至1年•EBNA-1–IgG:病毒基因组处于潜伏状态,此时细胞只合成EBV核抗原•EBV感染四种组合抗体检查:VCA-IgM、VCA-IgG、EA-IgG、EBNA-1-IgG)•EBV-DNA载量测定(最常用的标本是外周血)已经被广泛应用于EBV相关疾病的诊断、病情监测、治疗效果评估和预后判断等。无菌体液(如肺泡灌洗液、脑脊液等)样本也可检测EBV-DNA,用于EBV相关疾病的辅助诊断。16•血清或血浆中EBV-DNA阳性提示患者体内存在活动性EBV感染或疾病与EBV密切相关(如原发EBV感染早期、EBV-HLH、大多数CAEBV、EBV相关肿瘤等),需结合临床表现及其他检查结果综合分析判断;•血清或血浆EBV-DNA阴性提示为血清阳性转化的EBV健康携带者、未感染过EBV的患者、非EBV相关疾病患者、以及部分EBV...