BDFACSCalibur流式细胞仪简单操作技巧步骤

BD FACSCalibur 流式细胞仪简易操作步骤一、开机1）先打开净化交流稳压电源，其次打开 110V 稳压输出电源，再次打开流式细胞仪，最后打开计算机。2）向前拉开储液箱抽屉，检查鞘液筒、废液筒水量，如需充填鞘液，先将减压阀（红色箭头所示）方向调在 VENT 位置（箭头方向），再加入超纯水，保持水位在鞘液桶的3/4 左右，加好后拧紧桶盖并将减压阀方向调在 RUN 位置。二、开启 CellQuest 软件、编辑实验文件1） 在屏幕下方点击 CELLQuest（第四个图标） 启动软件。桌面会出现一’Untitled’实验文件，可点击实验文件的左上角的放大钮（绿色），将实验文件窗口放大。电子版本:\\NOVOPUBLIC\NovoBio\流式细胞仪\BD FACSCalibur 流式细胞仪简易操作步骤_corr_ZYH_20140520- 1 --*2） 从工具板中点击散点图图示。在实验文件的空白区点击，拖曳对角线至适当大小，然后放开鼠标。出现散点图对话方框（当所要编辑的图窗口被选中时，会在其四角出现四个小黑块）。3） 在出现的散点图对话方框中点击 Plot Source，选择 Acquisition and Analysis (收取、分析) ，确认 X 和 Y 轴参数预设为 FSC-H 1024、SSC-H 1024。对话方框内选择 X 轴：FL1-H 1024；如果是双标，Y 轴选择：FL2-H 1024(根据实验检测样品确定所选通道，本步骤选 FL1/FL2 来说明)，如果是单标，Y 轴选择：SSC-H。点击 OK，FL1/FL2 的散点图出现。完成后可将重制图移至原图右方。4）从屏幕上方 Plots 菜单中选择 Dot Plot 功能，可复制一个同样大小的散点图，在出现的-*说明：散点图（Dotplot），又称二维散点图是流式分析最常用图谱，它可以显示两个独立参数的相互关系。在图中， 横坐标 X 轴和纵坐标 Y 轴参数分别设为 FSC-H 1024、SSC-H1024；双荧光标记时，第二图 X 和 Y 轴参数分别设为 FL1-H 1024、FL2-H 1024，X 轴为为荧光 1 强度的相对值，单位是道数， Y 轴则通常表示荧光 2 或光散射强度的相对值。仪器使用者可因实验需求来修改所有图谱中显示之参数。修改动作为轻击图谱上X 和 Y 轴参数，并依需要选择之（FSC：细胞大小，SSC：细胞折射率，FL1：FITC 绿色荧光，FL2：PE 橙色荧光，FL3：PerCP 红色荧光）。5） 在工具板中选择四象限工具，在 FL1/FL2 散点图上拖动Quadrant 的中心将它设定在（x，y）＝（101，101）处，这些象限将指定阴性/阳性区域。6）从工具板中点击直方图图示，在实验文件的空白...