免疫磁珠技术VIP免费

免疫磁珠技术（免疫磁珠技术（IMBIMB）在食）在食品有害微生物检测中的应用品有害微生物检测中的应用目录1免疫磁珠技术简介1.1免疫磁珠的结构与性质1.2免疫磁珠技术2免疫磁珠技术的应用2.1IMB技术在食品有害微生物检测中的应用2.2免疫磁珠与其它检测手段的联用2.3免疫磁珠技术在其他领域的应用2.4免疫磁珠技术的优缺点及发展方向1.免疫磁珠技术简介1.1免疫磁珠的结构与性质1.1.1免疫磁珠的结构免疫磁珠（IMB），也称免疫磁性微球，是一种均匀、具有超顺磁性及保护性壳的球形小粒子，基本上由载体微球和免疫配基结合而成。其核心为顺磁性粒子，核心外层包裹一层高分子料，最外层是免疫配基。载体微球载体微球功能基高分子层磁性物质金属小颗粒（Fe2O3、Fe3O4）如聚乙烯亚胺、聚乙烯醇、聚醋酸乙烯脂、聚丙烯酸、酶类、多糖（淀粉、纤维素、葡聚糖、果胶等）、球蛋白和牛血清白蛋白等，如氨基(-NH2)、羧基(-COOH)、羟基(-OH)，使其表现具有疏水-亲水、非极性-极性、带正电荷-带负电荷等不同的物理性质。免疫配基免疫配基通过生物高分子的功能基团结合到磁性载体微球上形成免疫磁珠。由于载体微球制备材料和方法不同，其表现出的物理性质也不同，从而可结合不同的免疫配基，如抗原、抗体、凝集素、DNA和RNA等。配基必须具有生物专一性的特点，而且载体微球与配基结合要不影响或改变配基原有的生物学特性，保证磁珠的特殊识别功能。1.1.2免疫磁珠的性质由于免疫磁珠的大小和形状具有均一性，从而可使靶物质迅速和有效地结合到磁珠上，也可使生成的新复合物在磁场中具有相同的磁响应性，且行为一致磁珠的球形结构可消除与不规则形状粒子有关的非特异性结合顺磁性可使磁珠置于磁场时显示其磁性，并做定向移动，从磁场移出时磁性消除，磁珠分散，由此可方便地进行分离和磁性导向保护性壳可防止磁性内核漏出或被载液腐蚀；免疫配基可特异性地结合反应体系中相应的抗原、抗体、核酸等生物活性物质。1.2免疫磁珠技术免疫磁珠(immunomagneticbead,IMB)技术：是一种以特异的抗原抗体反应为基础的免疫学检测和分离技术。它是以抗体包被的磁珠为载体，通过抗体与反应介质中特异性抗原结合，形成抗原—抗体复合物，此复合物在外加磁场的作用下发生定向移动，从而达到分离抗原的目的。基本原理：磁性微球经过一定处理后,可将抗体结合到磁珠上,形成免疫磁性微球,免疫磁性微球的抗体与特异性抗原结合形成抗原—微球复合物,该复合物在磁场中具有与其它组分不同的磁响应性,在磁力作用下,该复合物发生力学移动,从而达到分离抗原的目的。2.1食品有害微生物检测中的应用免疫磁珠技术与常规检验方法相比具有显著的优点，它能从样品中迅速、有选择性地分离出目的微生物，有效地减少了背景的干扰，提高了精准性。还能捕获受损伤的靶细菌，而目前所用的几种常规方法则不具备这样的能力。目前，免疫磁珠技术已经广泛应用于食品样品中致病微生物的检测。2.免疫磁珠技术的应用2.1.1大肠杆菌O157的检测传统分离E.coliO157H7∶所采用的直接分离法存在着鉴别力差、抑制杂菌能力弱、耗时长、工作量大等缺点。采用免疫磁珠技术，能够快速地从各种食品样品中分离富集E.coliO157H7∶，满足流行病学的研究要求和提高控制力度。现在这种免疫磁珠的方法已经被英国公共健康服务实验室认定为标准的分离方法，我国也已将免疫磁珠法对大肠杆菌O157的检测纳入国家标准（GB/T4789.36-2008）和出入境检验检疫行业标准(SN/T1059.5-2006)。检样25g(mL)+225mL改良EC肉汤（mEC+n），均质225mL免疫磁珠捕获涂布CT-SMAC平板和改良CHROMagarO157弧菌显色琼脂平板挑取可疑菌落5个~10个，氧化酶阴性，革兰氏阴性杆菌接种TSIMUG-LST阳性GB/T4789.36-2008免疫磁珠捕获法检测程序阴性血清学试验非O157细菌生化试验报告↓↓↓↓↓↓↓↓36±1oC18h~24h36±1oC36±1oC18h~24h18h~24h增菌免疫磁珠捕获与分离1.将Eppendorff管按样品和质控菌株进行编号，每个样品使用1支Eppendorff管，然后插人到磁板架上。在漩涡混合器上轻轻振荡E.coliO157免疫磁珠溶液后，用开盖器打开每支Eppendorff管的盖子，...